为建立 5 -脂氧合酶 (5 L O)诱导表达系统 ,深入研究 5 L O功能、信号转导机制及药物筛选 ,采用 PCR扩增含 H ind 酶切位点的 2 kb长的 5 L O c DNA基因片段并将其克隆入质粒 p BI- G中构建重组表达载体 p BI- 5 L O。 p BI- 5 L O/ p TK- Hyg共转染 Tet- He L a细胞。多西环素与转染细胞孵育 4 8h诱导目的基因表达。对构建的重组载体 p BI- 5 L O进行序列测定 ,证实克隆的目的基因片段是 5 L O基因片段 ,且阅读框架正确。X- gal染色证实多西环素能诱导目的基因表达 ,阳性细胞的细胞核被染为蓝色。提示 5 L O诱导表达系统建立成功 ,证实其在细胞模型上系统工作