目的：采用反相高效液相色谱（RP—HPLC）内标法测定培养的猪肝细胞利多卡因浓度，以初步评价球体培养的猪肝细胞利多卡因代谢功能。方法：采用原位胶原酶循环灌注法分离猪肝细胞，以1×10^7／ml密度接种至无血清培养基中，分别采用球体培养法和贴壁培养法培养0～7d。分别于培养0、1、3、5、7d在培养液中加入利多卡因100ng／ml。用锥虫蓝拒染试验检测培养肝细胞的活率；在倒置显微镜下观察肝细胞形态；采用RP—HPLC内标法测定培养24h后上清液中利多卡因浓度。结果：培养3～7d，球体培养组肝细胞活率高于贴壁培养组（P％0．05）。球体培养24h后80％～90％的肝细胞形成多细胞球形聚集体。培养1～7d，球体培养组利多卡因浓度低于贴壁培养组（P〈0．05）；两组在培养第3天时利多卡因浓度最低。结论：RP—HPLC内标法可用于测定培养的猪肝细胞利多卡因浓度，方法灵敏、准确、快速。高密度下球体培养猪肝细胞利多卡因代谢功能高于贴壁培养，以培养第3天为最强。[著者文摘]