[摘要]目的获得具有较高纯度和酶活性的烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶-1(Nmnat1),为进一步对其功能及调控的研究奠定基础。方法在大肠杆菌中进行Nmnat1表达的条件优化,采用Ni-NTA 亲和层析法对目的蛋白进行纯化,并通过酶联荧光法测定酶活性。结果BL21-CondonPlus (DE3)-RIL为适宜的宿主菌,优化的蛋白表达条件为: 在2×YT培养基(37 μg/ml氯霉素和75 μg/ml卡那霉素)中于28℃、0.5 mmol/L IPTG(isopropyl beta-D-thiogalactopyranoside, 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)诱导8 h。纯化获得的Nmnat1蛋白具有较高的纯度和酶活性。结论适宜的宿主菌对Nmnat1蛋白的高效表达至关重要,进行表达条件优化后可获得大量具有较高纯度和酶活性的目的蛋白。