【立项依据】 不孕症已成为世界范围内广泛关注的问题,其中男性不育症占约50%,并有逐渐增加趋势。研究表明,环境污染导致的男性不孕问题尤为突出,并成为急需解决的问题。 【设计思路】 近年来,β-连环蛋白(β-catenin) 信号通路在生殖系中的作用日益受到瞩目。β-catenin调节睾丸内生殖细胞发生发育的功能、调控睾丸曲细精管索的正常发育、苗勒氏管的退化等。但其在环境毒素诱导的男性不育症中的机制尚不清楚。 【实验内容】 雄性C57BL/6小鼠 (8周龄,体重20 g)随机分为2组,每组8只:对照组(1个月)和染毒组(1个月)。适应性饲养1周后染毒,染毒组采用灌胃方式,一次性给予50 μg/kg 的二噁英(TCDD),对照组仅给予玉米油。染毒结束后以股动脉放血方式处死所有实验动物。我们将利用精子数检测、H-E 染色法观察TCDD对精子的影响,并用TUNEL染色法观察细胞凋亡。睾丸中的同时利用免疫组化染色法检测β-catenin在睾丸中的组织学分布,并用免疫蛋白质印迹法检测β-catenin的变化。 【材料】 动物:雄性C57BL/6小鼠;药物:玉米油,TCDD;染色液:二甲苯,乙醇,伊红酒精溶液,苏木精染液,TUNEL;抗体:β-catenin 【可行性】 (1)参阅大量文献, 具有坚实可靠的理论依据。(2)课题组成员均全力工作,有能力按时完成本课题。(3)具有完善的实验设备及技术支持。 【创新性】 报道TCDD诱导的精子发生异常中β-catenin的变化,揭示新的有效的TCDD调节因子。