【立论依据及设计思路】 阿司匹林对结肠癌的治疗作用已有广泛报道。PDL-1在肿瘤发生发展中作用关键;肿瘤组织中TGF-β1与PGE2对PDL-1表达水平有正性调节作用;而阿司匹林是COX抑制剂,可下调PGs。此外,阿司匹林能够促进TGF-β1的代谢。由此我们猜测阿司匹林有可能通过下调TGF-β1和PGE2水平,进而下调肿瘤组织中PDL-1水平,从而抑制肿瘤发生发展。因此,本项目将通过一系列体内、体外实验揭示阿司匹林对PDL-1、TGF-β1与PGE2的作用,阐明阿司匹林治疗肿瘤的机制,为阿司匹林治疗结肠癌的临床运用提供更充分的科学依据。 【实验内容】 (1)分子水平:共培养DC细胞和结肠癌细胞,检测阿司匹林治疗组和空白对照组中PDL-1、TGF-β1和PGE2表达水平。(2)大体水平:构建AOM/DSS小鼠结肠癌模型。将模型小鼠随机分成阿司匹林治疗组和空白对照组两组。80 d后分别测肿瘤大小、数量和分期,比较TNM分期和分化程度,细胞凋亡,PDL-1的表达及分布情况。 【材料】 阿司匹林,BALB/C近交系小鼠,TGF-βelisa kit,PGE2 elisa kit,DC细胞株,结肠癌细胞株,PDL-1抗体等。 【可行性】 (1)本项目立项依据充分。本项目由课题组成员通过文献阅读自行提出,理论上可行。(2)本项目科学意义重要。Science杂志评选出2013年世界十大科技突破,癌症的免疫治疗名列榜首,阿司匹林对于结肠癌的治疗作用和PDL-1在肿瘤发生发展中的作用机制是目前的研究热点。本项目从DC细胞中PDL-1分子的表达入手,阐述了阿司匹林抑制结肠癌的分子机制。(3)先进的实验室平台。指导教师实验室为国家重点实验室,拥有完成项目的仪器设备。项目采用的动物和细胞模型、刺激因素等均为国际通用的经典模型和药物。阿司匹林为临床常用药物,实验所需的分子生物学试剂均可从国内外公司购买。 【创新性】 阿司匹林对于结肠癌的治疗作用在2013年已有文献报道,但是对于其抑制结肠癌的具体机制尚未研究清楚。本项目从DC细胞中PDL-1分子的表达入手,阐述了阿司匹林抑制结肠癌的分子机制。