摘要:几百年来,人们一直对自然界中的再生现象怀有极大的兴趣.随着分子生物学研究手段的发展,人们在分子水平上对再生的机制有了更深入的认识.目前对两栖类再生的分子机制研究已经越来越深入,而且越来越多的实验证明哺乳类动物也具有再生能力,至少两栖类和哺乳类在损伤修复中的机制可能是保守的.因此,对再生的机制研究有可能在临床上为损伤修复带来更好的治疗手段.本文希望通过对蝾螈附肢与哺乳动物再生能力及机制研究的介绍,使读者能对这一领域有初步的认识.

摘要:目的:利用报告基因监测肝干细胞的分化走向.方法:通过PCR从小鼠基因组中克隆了细胞角蛋白19启动子片段,构建了细胞角蛋白19启动子调控的绿色荧光蛋白(pCK19 EGFP)和白蛋白启动子调控的红色荧光蛋白报告载体(pAlbDsRed),并利用报告载体标记的肝干细胞(liver epithelial progenitor cells,LEPCs)观察了悬浮培养时LEPCs的分化去向.结果:白蛋白/细胞角蛋白19启动子调控的红绿双色荧光蛋白报告载体可以实时地显示肝原始细胞在不同的诱导环境下的分化走向.结论:双色荧光蛋白报告载体的成功构建为研究LEPCs的分化、筛选可诱导LEPCs定向分化的分子提供了便捷的工具.

摘要:目的:建立表达红色荧光蛋白DsRed的逆转录病毒载体,并对肝原始细胞进行体外标记和体内示踪研究.方法:将pDsRedl 1载体中的DsRed片段克隆到逆转录病毒载体pLNCG C1中构建了pLNCG DsRed载体.将该载体导入Phoenix包装细胞,进而采用乒乓转染的方法感染包装细胞PT67,获得高滴度稳定产毒的PT67细胞系.结果:利用PT67细胞系产生的病毒上清可以高效的感染体外培养的肝原始细胞系.将这些DsRed标记的肝原始细胞移植到小鼠损伤肝脏中,4周后可以在再生肝脏中清晰地观察到具有红色荧光的外源细胞.结论:由于肝脏组织没有红色自发荧光,用DsRed标记肝原始细胞进行肝内示踪时背景干扰小.

摘要:目的:从孕4.5～6周的人胚胎肝脏中分离培养肝干细胞,并观察其在重症联合免疫缺陷(SCID)小鼠损伤肝脏中的植入.方法:从孕4.5～6周的人胚胎肝脏中分离干细胞并进行体外长期培养,用RT PCR方法检测肝干细胞相关分子标志以及八聚物结合蛋白4(Oct-4)的表达,然后植入经四氯化碳(CCl4)造成急性肝损伤的SCID小鼠体内,在移植后2、l0、17d分别对受体鼠肝脏冰冻切片进行荧光观察和H-E染色.结果:所建立的胎肝细胞系不仅表达二肽水解酶Ⅳ(DPPⅣ)、白蛋白(Alb)、细胞角蛋白(CK)19、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、CK18、肝细胞生长因子受体(c-met)、干细胞因子受体(c-kit)等肝干细胞相关标志,还表达干细胞转录因子Oct-4.在细胞移植后2 d,肝脏冰冻切片未见绿色荧光;移植后10 d和17d肝脏冰冻切片见散在的绿色荧光.对同一切片做H-E染色,发现绿色荧光部位为肝板内的多个成熟肝细胞.结论:从人胚胎肝脏中分离的干细胞能够植入SCID小鼠的损伤肝脏.

摘要:目的:从人肝细胞癌中分离肝癌细胞并对其体外诱导分化特性进行分析,试图得到有关导致肝癌发生的"癌干细胞"的相关资料.方法:首先将人原发性肝癌组织小块在裸鼠皮下过继接种,然后将生成的肿瘤进行原代培养并得到单层生长的肿瘤细胞系,利用体外诱导实验对其形态及分子表型的变化情况进行观察和分析.结果:所分离获得的细胞系具有肝肿瘤细胞的特征,但也表达某些干细胞的分子标志如c-met.体外诱导分化实验提示胰岛素/氢化可的松、二甲亚砜可能具有诱导该细胞向成熟肝细胞方向分化的作用,诱导后的细胞又重新表达葡萄糖6-磷酸酶,白蛋白表达明显升高.结论:人P2-HCC细胞具有强大的增殖能力,体外实验提示其具有一定的向成熟肝细胞分化的潜能.这些细胞的发生与肝癌干细胞及肝细胞的关系尚待进一步研究.

摘要:目的:探究C57小鼠单纯2/3肝切除后肝组织内与再生和肝干细胞有关的病理形态学变化及其意义.方法:在4个对照组(正常组、假手术组、倒千里光碱组和倒千里光碱2/3肝切除组)的参照下,观察实验组C57小鼠单纯2/3肝切除后不同时间肝脏病理形态变化(核分裂相和卵圆细胞等)和CK19、AFP免疫组化检测情况.结果:单纯2/3肝切除后小鼠均出现不同程度的成熟肝细胞通过大核分裂相分裂增生、轻重不等的小胆管/终末胆管增生反应和个别例中有类似于倒千里光碱肝切除模型组的卵圆细胞增生;尤其还有大小核分裂相分布等一些文献未提及的形态学改变.结论:本研究提出肝流域假说的初步设想:肝内成体干细胞存在于小胆管/终末胆管附近,是肝主质细胞的重要源头;在其向中央静脉方向的流向上产生各级分化程度不同的子代(自卵圆细胞到小肝细胞、成熟肝细胞),沿肝板形成该流域干流;而经由血流到达肝脏的过客性干细胞可不同程度地在不同区段作为该流域的支流汇入干流并转分化为肝系细胞.

摘要:目的:分离人骨髓间充质干细胞(hMSCs),建立克隆化扩增的细胞系并初步鉴定其分化特性和细胞的分子标记.方法:利用间充质干细胞贴壁生长的特性,显微镜下挑取原代单个成纤维样生长单位中的细胞,逐步扩大培养,最终得到克隆化扩增的hMSCs.选择有利于其生长的血清,低密度培养,传70％～80％生长汇合时传代保种.RT-PCR检测其Oct-4、SDF1、CD49a、CK19、c-met基因的表达;流式细胞术检测细胞表面抗原CD34、CD45、CD14、CD44、CD29、CD90、HLA-1和HLADR;体外向骨、软骨、脂肪细胞方向诱导分化鉴定其分化潜能.结果:建立了人骨髓间充质干细胞系并在体外实现了克隆化扩增,该细胞系在体外连续培养达60个细胞倍增时间仍保持多向分化的潜能.细胞不表达CD34、CD45、CD14、HLA-DR,但表达Oct-4、SDF-1、CD49a、CK19、c-met、CD44、CD29、CD90、HLA-1.体外能诱导出骨、软骨、脂肪细胞.结论:得到了一个可稳定传代的克隆化扩增的人骨髓间充质干细胞系,该细胞系在体外可以分化为骨、软骨、脂肪细胞,并表达Oct-4、CK19和c-met.

摘要:目的:探讨经静脉或骨髓内输注异体猕猴间充质干细胞(MSCs)的安全性以及异体MSCs是否能归巢骨髓并长期存活.方法:用密度梯度离心和贴壁筛选法分离、培养猕猴骨髓中的MSCs,观察其生物学特性.用流式细胞仪检测MSCs的细胞表型,采用不同培养条件诱导多向分化,用特异性染色鉴定;将雄性猕猴的MSCs经静脉输注或骨髓内输注给雌性猴,评价其不良反应和移植物抗宿主病(GVHD)表现,用PCR法检测受者骨髓中的Y特异性序列,评价MSCs在异体存活情况.结果:成功培养了猕猴的MSCs,多向分化实验证明其可分化为脂肪和成骨细胞;输注后未见急、慢性毒性反应和GVHD表现,部分雌性猕猴体内可检出Y特异性序列.结论:猕猴异体静脉或骨髓内输注MSCs未见急、慢性不良反应和GVHD,MSCs可在异体骨髓内存活.

摘要:目的:研究自然杀伤细胞(NK)在异基因骨髓移植中对移植物抗宿主病(GVHD)的影响.方法:以近交系小鼠C57BL/6(H-2b)为供鼠、BALB/c(H-2d)为受鼠,在移植物中增加供者的外周T细胞和(或)NK细胞进行异基因骨髓移植,根据临床表现和病理检查,比较不同移植组的存活率和GVHD发生情况.结果:增加1×106供鼠NK细胞的移植组中40％小鼠出现GVHD,增加2×106供鼠NK细胞的移植组中仅30％出现GVHD;与单纯异基因骨髓移植细(80％急性GVHD、20％慢性GVHD)和骨髓+T细胞组(100％急性GVHD)比较,GVHD发生率显著下降(P＜0.01),30、60和120 d存活率显著增高(P＜0.01).结论:在小鼠异基因骨髓移植中,同种异基因反应性NK细胞可抑制GVHD效应,延长存活期.

摘要:目的:分析HBV转基因在乙肝转基因小鼠C57 TgN(HBVadr2.0)SMMU"3号"品系基因组中的整合特征.方法:以F6～F17代乙肝转基因小鼠C57 TgN(HBVadr2.0)SMMU为研究对象,采用基因组DNA PCR、Southern印迹和DNA测序的方法,分析HBV转基因在该品系转基因小鼠基因组中的整合特征.结果:PCR分析显示,F6～F17代乙肝转基因小鼠基因组中均已稳定整合了相同拷贝数的HBV转基因,整合的HBV DNA可通过生殖系在世代间稳定遗传.整合在转基因小鼠基因组中的HBV DNA含有HBVpres、s、c、x基因,Southern印迹证实HBV转基因含有全长HBV基因组DNA,DNA测序结果表明,该品系转基因小鼠所整合的转基因为adr亚型的HBV DNA.结论:C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU"3号"品系转基因小鼠基因组中均整合有adr亚型的全长HBV基因组DNA,从DNA水平证实该转基因小鼠品系已具备了乙肝实验动物模型的基本条件.

摘要:目的:分析C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU"3号"品系转基因小鼠血清和组织中病毒蛋白的表达及其特征.方法:以138只F6～F17代C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU"3号"品系的转基因小鼠为研究对象,采用血清ELISA检测和免疫组织化学的方法分析病毒蛋白在转基因小鼠中的表达.结果:转基因小鼠血清中HBsAg和HBeAg的阳性率分别为55.18％和25.00％,血清中HBsAg的出现时间多在3个月龄之前(占93.33％),且持续时间在9个月以上(占95.56％),个体之间具有一定差异.转基因小鼠肝组织中至少可检测到一种病毒蛋白,HBsAg、HBcAg和X蛋白的检出率分别为85.82％、58.24％和49.61％.HBsAg分布于肝细胞质中,HBcAg和X蛋白既可分布于肝细胞核中,也可分布干肝细胞质中.HBsAg的表达具有细胞特异性(门管区周围的肝细胞)和组织特异性(肝和肾),X蛋白除在肝脏和肾脏中表达外,还可在脑组织中表达.结论:C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU"3号"品系转基因小鼠血清和肝肾等组织中有病毒蛋白的表达,病毒蛋白的分布具有组织细胞特异性和个体差异.

摘要:目的:分析C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU"3号"品系转基因小鼠的月龄、性别和遗传背景与其血清和肝组织中HBsAg表达模式的关系.方法:采用血清ELISA检测和免疫组织化学的方法检测转基因小鼠血清和肝组织中HBsAg的表达,统计学方法分析转基因小鼠血清和肝组织中HBsAg的表达与小鼠的月龄、性别、遗传背景的相关性.结果:转基因小鼠在出生后1～3个月时,血清中HBsAg的表达较低或甚至不表达,8个月龄左右时最高,此后逐渐降低,但肝组织中HBsAg的表达相对稳定在较高水平,能真实反映转基因小鼠中HBsAg的表达.雄性小鼠血清和肝组织中HBsAg的表达量高于雌性小鼠(P＜0.05).转基因小鼠与C57BL/6品系、DAB品系和129s品系正常小鼠交配后的子代,其血清和肝组织中HBsAg表达量均未发生变化.血清阳性的小鼠中肝组织HBsAg阳性率为94.05％,两者呈正相关关系(r=0.257,P＜0.01).结论:C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU"3号"品系转基因小鼠血清和肝组织中HBsAg的表达具有发育调节和性别差异.

摘要:目的:研究乙型肝炎转基因小鼠品系C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU肝脏的组织学及免疫病理学特征.方法:以168只SPF级乙肝转基因小鼠及15只正常C57BL/6小鼠为研究对象,取肝组织连续切片,常规H-E染色,并选取20例有明显单个核细胞肝内浸润的肝标本,免疫组化原位鉴定白细胞分化抗原的肝内分布.结果:37.5％的转基因小鼠肝脏出现人慢性轻度乙型肝炎样的病理改变,病变率随月龄增大显著增高;32.7％有更轻微的非特异性炎症反应;肝内浸润的单个核细胞多数为CD3+、CD4+细胞,未发现CD57+、CD8+细胞浸润.结论:乙肝转基因小鼠C57 TgN(HBVadr2.0)SMMU肝脏可出现不同程度的病理改变,与人慢性轻度乙肝组织学相类似.

摘要:目的:构建HBV表面抗原preS2-S基因表达质粒,并探讨其在小鼠体内的表达及诱导体液免疫应答的能力.方法:采用PCR方法,以PBR322-HBV2.0(adr亚型)质粒DNA为模板获得HBV preS2-S基因,并将其重组进入pcDNA3.0表达载体中,转染7721细胞系进行稳定表达;以此重组质粒免疫小鼠,ELISA方法检测免疫小鼠抗HBs抗体浓度.结果:构建了HBV preS2-S基因的表达质粒pcDNAS2-S,该表达质粒可在7721细胞中稳定高效表达;免疫接种小鼠2周后抗HBs抗体浓度明显升高,接种后第4周布比卡因处理组小鼠抗HBs抗体的浓度达到峰值161.4 mIU/ml,布比卡因非处理组第5周抗HBs抗体的浓度可达133.7 mIU/ml.结论:所构建的pcDNAS2-S表达质粒能有效表达并诱导小鼠体液免疫应答.

摘要:目的:应用Cre/loxP系统建立诱导型糖皮质激素受体(GR)基因剔除小鼠模型,为在体内直接进行GR基因的研究提供条件.方法:针对GR基因第2外显子构建诱导型目标载体,将打靶载体电穿孔转染胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES),经Southern杂交筛选发生正确同源重组的ES细胞,囊胚注射法制备嵌合体并进行生殖系检测及纯化建系.结果:成功构建了针对GR基因第2外显子的诱导型目标载体,转染ES细胞获得了工程化的ES细胞,经囊胚注射获得了由工程化的ES细胞和体细胞共同发育而来的嵌合体小鼠.结论:基于Cre/loxP系统的GR基因条件性打靶嵌合鼠的获得,为得到理想的诱导型GR基因剔除小鼠模型奠定了基础.

摘要:目的:探讨如何通过改善小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES)的培养条件来维持其未分化状态,提高嵌合体的制备效率.方法:以普通ES细胞培养液为对照,以TX-WES培养液为ES细胞条件培养液分别对15代以上的未工程化ES细胞和糖皮质激素受体(GR)工程化ES细胞进行培养并筛选,通过囊胚注射制作嵌合体来比较2种不同培养液培养ES细胞后嵌合体制备效率的差别.结果:未工程化ES细胞以普通培养液培养其嵌合率为25.0％,以TX WES培养液培养其嵌合率提高到53.8％(P＜ 0.05);GR工程化ES细胞以普通培养液培养其嵌合率为15.0％,以TX-WES培养液培养其嵌合率提高到52.3％(P＜0.05).结论:应用TX-WES培养液改善小鼠ES细胞的培养条件可提高嵌合体的制备效率,该方法为基因剔除小鼠研究的顺利开展奠定了良好的基础.

摘要:目的:研究不同受精卵移植数量与小鼠胚胎发育率的关系,以提高转基因小鼠制备效率.方法:取正常(共966枚受精卵,分6组,每组10～12例)及已进行显微操作的小鼠受精卵(共2349枚受精卵,分为5组),移入假孕的受体小鼠输卵管内,统计分析其生产率及得仔率.结果:正常组移植小鼠移植1～5,6～10,11～15,16～20卵组与移植21～25,26～30组比较得仔率高(P＜0.01).转基因组小鼠单侧输卵管内移卵11～15枚或16～20枚的组,其得仔率较其他(移植1～5、6～10、21～25枚各组)高(P＜0.01).结论:受精卵移植数量与转基因小鼠胚胎发育率有关,以一次移卵11～20枚效果最好.

摘要:目的:构建PCP-2胞外区(PCP-2EC)与人免疫球蛋白IgG Fc融合蛋白表达载体,在哺乳动物细胞中表达并纯化PCP-2EC/Fc蛋白,研究其在神经细胞黏附中发挥的作用.方法:以PBLIISK-PCP-2为模板扩增PCP-2EC片段,定向插入真核表达载体pIGplus;重组质粒分别转染COS-7细胞和293细胞,可溶性表达PCP-2EC/Fc融合蛋白,并通过金葡菌蛋白A特异性纯化;以此融合蛋白作为基质,观察原代培养神经元的黏附情况.结果:成功构建PCP-2EC/Fc融合蛋白表达载体,表达载体的构建与预期设计相符;进一步在哺乳动物细胞中表达并纯化PCP-2EC/Fc蛋白;PCP-2EC/Fc蛋白可以促进原代培养神经元的黏附作用.结论:本研究成功地构建了PCP-2EC/Fc融合蛋白真核表达载体,获得有活性的PCP-2胞外区可溶性分子,初步研究发现其在神经细胞黏附中发挥促进作用,为后续神经及其他领域中的功能研究奠定基础.

摘要:目的:探讨用基因工程方法表达的人可诱导共刺激分子(ICOS)与小鼠免疫球蛋白的融合蛋白竞争抑制ICOSB7RP1共剌激通路的作用.方法:以RT-PCR方法克隆编码人ICOS胞外片段,与编码小鼠免疫球蛋白IgG恒定片段(Ig)的基因融合,构建携带融合基因的高效真核表达载体pcDNA4/HisMAX A-ICOS-Ig.采用脂质体法转染CHO细胞,用Western 印迹法检测稳定表达细胞中融合基因的表达,流式细胞术检测重组蛋白的配体结合活性.以适当浓度的重组融合蛋白作为拮抗剂与BALB/c和C57BL小鼠脾单个核细胞进行混合培养,观察重组蛋白在体外抑制淋巴细胞增殖的效果.结果:构建了携带融合基因的高效真核表达载体pcDNA4/HisMAX A-ICOS-Ig;Western印迹法检测表明转染细胞有重组蛋白的表达;流式细胞术分析显示重组蛋白有配体表达细胞的结合活性;该重组融合蛋白作为拮抗剂可体外抑制混合淋巴细胞增殖.结论:构建并成功表达了ICOS-Ig融合基因高效真核表达载体;该重组蛋白具有配体结合活性,可在体外通过抑制ICOS-B7RP1共刺激通路抑制淋巴细胞增殖.

摘要:目的:建立疾病传播动力学研究中模拟流行的方法.方法:在建立传染病传播动力学模型的基础上,采用Vanguard DecisionPro软件中的Markov模型方法模拟疾病流行,以北京SARS流行模拟及模型的抽象研究为例说明其应用.结果:DecisionPro Markov模型可以直观地描述疾病传播动力学模型.在Markov模型中,各模型参数取值可以随时调整,并可通过编程实现;可以观察模型状态变量的实时变化,预测疾病的流行趋势;通过敏感性分析功能,可以研究模型变量之间相互作用的规律;通过想定研究方法,可以定量评价输入参数变化对流行的影响.实例研究发现,该方法很适合流行模拟研究,可以用于干预措施效果的定量评价.结论:DecisionPro Markov模型方法是一种较为理想的模拟疾病流行的方法,可以用于传播动力学模型的抽象研究.

摘要:目的:研究转化生长因子β1(TGF-β1)和细胞外信号调节激酶K1/细胞外信号调节激酶K2(ERK1/ERK2)对胰腺癌生长的影响及其相互关系,并探讨它们对胰腺癌作用的可能机制.方法:应用免疫组织化学技术检测临床胰腺癌患者病理组织中TGF-β1和ERK1/ERK2蛋白表达情况;MTT法观察不同剂量TGF-β1对人胰腺癌Panc-1细胞生长的影响;Western印迹法观察不同剂量TGF-β1对ERK1/ERK2蛋白表达的影响.结果:胰腺癌患者组织TGF β1、ERK1和ERK2蛋白均呈显著性高表达,其阳性表达率分别为66.67％(30/45)、86.70％(39/45)和84.44％(38/45),而在对照组织的阳性表达率分别为30％(6/20)、30％(6/20)和20％(4/20),两者间存在显著差异(P＜0.05);TGF-β1抑制Panc-1细胞生长,随着剂量的增加和作用时间的延长,其抑制作用逐渐增强,到第4天抑制作用达高峰,随后抑制作用不同程度的减弱,细胞生长速度加快;外源TGF-β1不能改变ERK1/ERK2蛋白的高表达状态.结论:胰腺癌患者病理组织强表达TGF-β1和ERK1/ERK2蛋白;外源TGF-β1在一定阶段抑制胰腺癌细胞系生长,但不改变ERK1/ERK2的表达;胰腺癌细胞逃避TGF-β1抑制作用的机制之一可能是高水平ERK1/ERK2的表达.

摘要:目的:探讨应用RT-PCR技术检测CK19 mRNA的优化方法.方法:采用RT PCR方法分别检测经病理确诊的胃癌组织及有明确肿瘤病灶的胃癌患者和健康对照者外周血中CK19 mRNA的表达.结果:通过设计多对引物进行对比及设立未经逆转录的RNA为模板的对照可观察到CK19假基因及基因组DNA的干扰现象.在合理设计错配引物的基础上选择合适的退火温度可消除干扰.结论:在运用RT-PCR法检测外周血中CK19 mRNA表达时常存在基因组及假基因等因素的干扰,通过本方法可有效地克服这种干扰作用.

摘要:目的:观察大鼠高位脊髓损伤后,脊髓损伤段及其邻近上下段α1-肾上腺素受体表达的变化,旨在探讨临床自主高反射下严重高血压发生的可能机制.方法:健康雄性Wistar大鼠42只,随机分为2组:假手术组(6只)和脊髓损伤组(36只).采用改良Allens打击法,建立脊髓T,节段重度损伤动物模型.假手术组仅咬除椎板,未打击脊髓.分别于损伤后1 d、3 d、1周、2周、3周和4周各处死脊髓损伤动物6只,取损伤段及邻近上下段脊髓,假手术组亦取相应不同节段脊髓组织.采用RTPCR法测定脊髓不同节段α1-肾上腺素受体mRNA表达情况.结果:与假手术组相比,脊髓损伤段以上节段在损伤后1d受体表达无明显变化,但3 d后表达减少(P＜0.05),1周时降至最低(P＜0.01),此后表达开始增加,2周时与假手术组无明显差异,至损伤后4周受体表达未见明显变化;损伤段在损伤后受体表达持续减少(P＜0.05),损伤后1周达最低(P＜0.01),此后受体表达开始逐步增加,但至损伤后4周仍未超过假手术组(P＜0.05);损伤段以下节段在损伤后1d受体表达显著减少(P＜0.01),损伤后3 d受体表达接近假手术组,此后受体表达持续增加,至损伤后4周受体表达超过假手术组(P＜0.05).结论:大鼠高位脊髓损伤4周后,脊髓损伤段以下节段α1-肾上腺素受体表达增加.α1-肾上腺素受体数目上调可能是引起自主高反射下严重高血压的重要中枢机制之一.

摘要:目的:观察伊曲康唑治疗甲真菌病的疗效、安全性及对甲生长速度的影响.方法:在全国15家医疗单位进行多中心开放性临床研究,患者采用口服伊曲康唑间歇冲击疗法,观察对靶甲(患甲)的临床疗效、真菌学疗效、不良反应及治疗后各期靶甲正常甲板的净增长长度.结果:该疗法对指甲真菌病及趾甲真菌病都有良好的疗效,对皮肤癣菌、酵母菌和非皮肤癣菌丝状真菌所致的甲真菌病都有很好的疗效,真菌清除率达97.86％,并在停药后有后续的治疗作用.停药后6个月和停药后9个月时,趾甲真菌病的靶甲正常甲板的净增长长度略高于指甲真菌病.未见严重不良反应发生.结论:该疗法对甲真菌病疗效确切,安全性好,对患甲尤其是趾甲真菌病有一定的促甲生长作用.

摘要:很多食管疾病需要行食管替代术,用自身组织行食管替代创伤大,术后并发症多,而现有的人工食管无法满足食管替代的要求.利用组织工程技术研究人工食管是解决这些问题的希望,本文就利用组织工程技术研究人工食管的发展进行综述.

摘要:目的:研究caspase-3抑制剂ⅢAc-DEVD-CMK干预治疗对大鼠短暂局灶性脑缺血模型的神经保护作用.方法:大鼠或不进行预处理(MCAO组),或分别经左侧侧脑室注射Ac-DEVD-CMK(DEVD组)、溶剂二甲亚砜(DMSO组)后,用线拴法制作大鼠左侧大脑中动脉(MCA)缺血/再灌注模型;通过Klenow标记及TUNEL染色技术检测鼠脑中单、双链DNA断裂;分别用原位杂交及免疫组化技术检测鼠脑中caspase 3和calpain mRNA及活性形式蛋白质的表达.结果:与MCAO组相比,DMSO组鼠脑缺血侧DNA单、双链断裂,caspase-3和calpain mRNA及活性蛋白质的表达均无明显差异;DEVD组缺血侧脑中Klenow及TUNEL阳性细胞数均明显减少,caspase-3及calpain的表达也明显减少.结论:Caspase-3抑制剂干预治疗短暂局灶性脑缺血具有潜在的临床应用价值.

摘要:目的:了解酮康唑、萘替芬、特比萘芬及酮康唑、萘替芬联合应用对临床分离致病皮肤癣菌的体外抗真菌活性.方法:参照M38-P方案并适当调整试验参数,对289株临床分离致病皮肤癣菌进行药物敏感性测定,其中包括红色毛癣菌210株、须癣毛癣菌51株、絮状表皮癣菌10株、玫瑰色癣菌6株、石膏样小孢子菌5株、断发癣菌5株、疣状癣菌2株.结果:酮康唑、萘替芬联合应用对皮肤癣菌的MIC值较低,单用酮康唑、单用萘替芬对皮肤癣菌的MIC值较高.结论:联合用药优于单用酮康唑、萘替芬,联合用药与特比萘芬之间的差异无统计学意义.

摘要:目的:观察严重急性呼吸综合征(SARS)患者临床治愈后各种并发症的恢复情况,进一步探讨其康复手段.方法:对56例临床治愈SARS患者进行6个月的随访及康复情况观察,主要观察骨坏死、肺纤维化及生化指标的变化.结果:临床治愈SARS患者在出院后经适当休息及口服药物治疗,急性期遗留的肝脏、心脏损害及糖代谢紊乱在出院1个月后大部分消失,但可出现轻微全身酸痛症状,持续时间稍长,在康复期出现1例肺纤维化及7例股骨头缺血坏死,需注意防治.结论:SARS患者并发症于康复期可渐渐消失,肺纤维化出现较少,股骨头缺血坏死需予积极的预防及适当治疗.

摘要:目的:观察介入栓塞术治疗甲状腺肿大型Graves病的近期和远期疗效.方法:18例甲状腺肿大型Graves病患者进行甲状腺介入栓塞治疗后,随访2年,观察临床症状、体征和并发症,复查血清游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)和甲状腺彩色多普勒(CDI).结果:术后1个月患者临床症状明显缓解,体征减轻,FT3、FT4恢复正常,CDI各参数显示栓塞效果满意;术后2年患者病情稳定,复查FT3、FT4均正常,并且没有严重并发症发生.结论:与Graves病传统的治疗方法相比,甲状腺介入栓塞治疗是一种全新的治疗手段,值得进一步深入研究.

摘要:目的:探讨病态窦房结综合征(SSS)的起搏治疗中各种起搏方式的比例及影响起搏方式选择的因素.方法:130例行起搏器安装术的SSS患者,其中男67例,女63例,平均年龄(64.2±11.9)岁,分析各种影响其起搏模式选择的因素.结果:植入起搏器能明显改善SSS患者的临床症状.130例患者共计手术149例次,生理性起搏占27.5％(41例次),其中心房按需型起搏(AAI)占10.7％(16例次),房室全自动型起搏(DDD)占16.8％(25例次).结论:生理性起搏,尤其是AAI起搏应用比例偏低的原因有:担心单腔心房起搏术后发生房室传导阻滞,心房电极固定技术较复杂.临床心内科医师对AAI起搏益处的认识不足也是造成AAI起搏比例偏低的一个主要原因.

摘要:目的:提高对蝶窦囊肿可致视力障碍的诊断水平和急诊内镜手术对预防和改善视力障碍意义的认识.方法:回顾性分析4例伴有视力下降的蝶窦囊肿的诊断过程.在鼻内镜下行急诊蝶窦囊肿开放引流术进行治疗.结果:4例患者头痛基本消失,视力有不同程度的提高.结论:不明原因视力障碍应考虑到由蝶窦囊肿引起的可能性,应尽早明确诊断.行急诊内镜手术可使视力障碍得到改善.

摘要:目的:评估尿液抗幽门螺杆菌(Hp)抗体检测对Hp感染的诊断及根治后疗效判断的应用价值.方法:应用ELISA法检测215例消化内科门诊患者的尿液抗Hp抗体,并以13C呼气试验(13C-UBT)为"金标准"进行双盲对比.结果:215例患者尿Hp抗体阳性99例,总阳性率为46.0％;13C-UBT阳性96例,阳性率为44.7％.尿Hp抗体结果与13C-UBT相符180例,符合率83.7％;不符35例,其中19例尿Hp抗体阳性而13C-UBT阴性,16例尿Hp抗体阴性而13C-UBT阳性.以13CUBT为标准,尿液抗体检测的敏感性为85.7％,特异性为93.6％,阳性预测率78.5％,阴性预测率89.3％,准确性为84.5％.Hp根治后1个月13C-UBT转阴率为76.7％,尿液抗Hp抗体转阴率为50.0％.结论:尿液抗Hp抗体检测是一种方便、价格低廉、非侵入性诊断Hp感染的方法,适合对Hp感染患者的筛选、普查和儿童患者,在一定程度上可监测疗效.

摘要:目的:总结脑深部刺激(DBS)治疗帕金森病的并发症和不良反应.方法:自2000年1月至2004年3月用DBS治疗帕金森病63例,共93侧.手术采用磁共振扫描结合微电极记录技术进行靶点定位.术后随访3个月至4年,平均7.3个月,对其并发症和不良反应进行分析.结果:DBS并发症和不良反应有电极放置不准重新调整2例,刺激电极与皮下导线连接处头皮切口破溃1例,胸部脉冲发生器植入处皮下感染1例,记忆力轻度减退2例,情绪改变7例,肢体异动19例,睁眼困难1例,但未发生明显的致残性永久并发症和不良反应.结论:DBS是一种微创外科治疗手段,提高手术熟练程度可降低其并发症和不良反应发生率.

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