摘要:

摘要:肝移植技术已成为临床治疗终末期肝胆疾病的重要手段,但术后常发生胆道并发症,严重影响移植疗效。经内镜处理肝移植术后胆道并发症已成为临床一线的治疗手段,但操作较为困难且繁复。近年来我科采用内镜技术处理肝移植术后胆道并发症患者千余例次,取得一些有益的经验。本文回顾总结了肝移植术后各型胆道并发症的内镜治疗策略、处理方法和技巧,可为进一步指导临床实践并提高疗效提供参考。

摘要:目的 探讨全覆膜自膨式金属支架(FCSEMS)在胆、胰疾病中的应用价值及其安全性和有效性。 方法 回顾性分析2008年1月至2012年6月接受内镜逆行胆胰管造影(ERCP)置入FCSEMS治疗的56例胆、胰管疾病患者临床资料,根据病情选择不同长度及类型的FCSEMS置入。内镜下择期拔除支架,随访患者终点疗效、支架移除率及相关并发症情况。 结果 使用FCSEMS治疗良性狭窄49例,包括肝移植术后吻合口狭窄32例、医源性胆管狭窄12例、慢性胰腺炎相关胰胆管狭窄5例; 随访5~38个月\[平均(15±8.6)个月\],支架放置时间1~15个月\[平均(8.4±5.3)个月\],治疗有效率为89.8% (44/49)。FCSEMS治疗胆道并发症7例,包括内镜下乳头括约肌切开术(EST)术后难治性出血4例,EST术后穿孔1例,肝移植术后胆漏2例; 随访1~12个月\[平均(5±3.7)个月\],支架放置时间1~8个月\[平均(1.8±0.5)个月\],治疗有效率为100%(7/7)。FCSEMS回收过程均顺利。与支架相关的不良事件包括:早期并发症5例(8.9%),包括ERCP术后胰腺炎2例、早期胆管炎2例、胆囊炎1例; 远期并发症7例(12.5%),包括支架滑脱2例、支架移位3例、支架相关性胆管炎2例。 结论 FCSEMS除了治疗传统意义上的胆、胰良性狭窄外,在处理胆道并发症方面也是潜在可替代手术的方法,且安全、有效。

摘要:目的 探讨内镜下多塑料支架置入治疗活体肝移植术后胆管狭窄的安全性与长期疗效。方法 2005年6月至2012年6月,共31例活体肝移植术后胆管狭窄患者接受内镜逆行胆胰管造影(ERCP)及多塑料支架置入治疗,记录内镜治疗技术成功率和ERCP相关并发症,对患者进行随访并观察支架维持时间、狭窄消除率和狭窄持续消除率。结果 ERCP证实单纯胆管吻合口狭窄22例,胆管吻合口狭窄合并胆漏9例。27例成功置入塑料支架,内镜治疗技术成功率为87.1%(27/31)。ERCP并发症包括急性胰腺炎1例,急性胆管炎2例,支架部分移位2例,无操作相关死亡发生,支架中位维持时间为9.6个月,狭窄消除率为95%(19/20),狭窄持续消除率为88.2%(15/17;随访5～43个月,中位随访期38个月)。 结论 内镜下多塑料支架置入治疗活体肝移植术后胆管狭窄是安全、有效的方法,其长期疗效满意,可成为活体肝移植术后胆管狭窄的一线治疗方法。

摘要:目的 比较经内镜同期置入双侧金属支架或双侧塑料支架治疗肝门部恶性胆道梗阻(MHBO)的疗效及安全性。方法 选取2007年5月至2011年12月需要进行双侧胆道引流的142例MHBO患者，其中32例采用双侧金属支架胆道引流(双金属支架组)，110例采用双侧塑料支架胆道引流(双塑料支架组)，统计内镜操作成功率、术后减黄有效率、内镜逆行胆胰管造影(ERCP)术后并发症及支架通畅期。结果 全组操作成功率为100%。双金属支架组和双塑料支架组术后减黄有效率分别为96.9%(31/32)和88.2%(97/110)，组间差异无统计学意义(P>0.05)。双金属支架组和双塑料支架组ERCP术后分别出现2例和6例胆管炎，经抗炎对症、更换支架或置入鼻胆管处理后症状缓解；双塑料支架组出现2例支架部分滑脱。两组均未发生胰腺炎、消化道出血、穿孔及ERCP相关性死亡病例。至研究终点，双金属支架组和双塑料支架组分别有2例和4例因其他原因死亡，死亡时胆道内支架均通畅；双金属支架组和双塑料支架组分别有8例和29例再发梗阻性黄疸，予以重新置入或更换塑料支架处理。两组ERCP术后并发症发生率差异无统计学意义(P>0.05)。双金属支架组的中位通畅期为(248.53±138.61) d，双塑料支架组的中位通畅期为(101.76±38.53) d，经Log-rank检验差异有统计学意义(P<0.001)。结论 对于Bismuth Ⅱ型或双侧胆管均已受侵、无法手术的MHBO，如果胆道引流范围许可、患者的预计生存期>3个月，双金属支架行胆道引流更具优势。

摘要:目的 探讨胆道支架引流联合腔内射频消融治疗胆道恶性梗阻的安全性及临床疗效。方法 前瞻性纳入18例因胆道恶性梗阻接受内镜逆行胆胰管造影(ERCP)治疗的患者,在胆管插管成功后,循导丝插入双极射频电极,于肿瘤部位进行射频消融,并留置胆道支架进行引流,观察治疗的安全性及临床疗效。结果 所有患者均成功接受射频消融治疗；胆道引流成功率为100%(18/18),12例患者留置塑料支架,6例患者留置金属支架,其中3例患者同期留置胰管支架；术后患者出现胆管炎2例,胰腺炎2例,均经短期对症治疗后控制；黄疸明显缓解率为61%(11/18)；中位随访期10.9(2.0~15.4)个月,3个月内支架通畅率为87%(13/15),6个月内支架通畅率为64%(9/14),12个月内支架通畅率为25%(2/8)；6个月生存率为67%(8/12),12个月生存率为50%(4/8)。结论 对于胆道恶性梗阻,胆道支架引流联合腔内射频消融治疗是安全可行的。

摘要:目的 探讨恶性胆、肠梗阻患者内镜下同期实施胆、肠双自膨胀金属支架(self-expanding metallic stent,SEMS)治疗的策略、方法及其安全性和有效性。 方法 回顾性分析2009年1月至2012年6月我院收治的阻塞性黄疸合并十二指肠恶性狭窄行内镜下同期置放胆、肠双SEMS患者的临床资料,分析内镜操作的成功率及并发症、术后黄疸消退及胃流出道梗阻评分系统(GOOSS) 评分情况。结果 共收治10例同期放置胆、肠双SEMS的患者,包括胰腺癌5例、胆囊癌2例、胆管癌2例及十二指肠乳头癌1例。5例Ⅰ型肠狭窄(病变未侵及十二指肠乳头)患者置入肠道SEMS后再行内镜逆行胆胰管造影(ERCP)成功放置胆道SEMS。另1例Ⅰ型肠狭窄患者放置长度9 cm的肠道SEMS后，再行超声内镜下顺行胆胰管造影（EACP），经超声内镜引导下胆管引流（EUS-BD）放置胆道SEMS； 3例Ⅱ型狭窄（病变侵及十二指肠乳头）患者行EACP，经EUS-BD放置胆道SEMS后，再经内镜置入肠道SEMS。1例Ⅲ型肠狭窄(远离十二指肠乳头)患者分别置入胆、肠SEMS。内镜操作成功率为100%。内镜操作术中2例Ⅰ型肠狭窄患者在内镜通过肠狭窄段时有肠壁自限性出血,未发生持续出血或穿孔等与内镜操作相关的并发症。黄疸消退及GOOSS评分改善明显。结论 对于胆道梗阻合并十二指肠狭窄不能手术切除患者,结合不同的内镜处理方式同期置入胆、肠双SEMS姑息性解除胆、肠梗阻是可行且安全、有效的。

摘要:目的 观察营养缺乏状况下干扰p53凋亡刺激蛋白2(ASPP2)对肝癌细胞增殖和凋亡的影响及机制。方法 构建RNA干扰抑制ASPP2的慢病毒载体表达体系并感染肝癌细胞HepG2,通过电镜观察、MTS法检测、流式细胞术检测以及形态学观察,探讨在缺乏氨基酸和血清的培养条件下干扰ASPP2表达对肝癌细胞HepG2增殖和凋亡的影响,并以自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)进行干预,探讨ASPP2下调后对细胞的作用是否与自噬有关。结果 在缺乏氨基酸和血清的培养系统里,电镜观察显示干扰ASPP2后自噬泡形成明显增加(P<0.05),荧光显微镜下可见GFP-LC3荧光自噬小体的表达提高(P<0.05)。MTS检测显示干扰ASPP2表达后HepG2细胞的增殖能力明显增强(P<0.05),而自噬抑制剂3-MA能够抑制其作用(P<0.05)。形态学观察发现干扰ASPP2能够提高HepG2细胞的抗凋亡能力,应用自噬抑制剂3-MA后细胞活性明显降低,出现了细胞内颗粒物增加等一系列早期死亡的症状。Annexin Ⅴ-PI 双染显示干扰ASPP2使细胞凋亡率由(38±5)%下降为(15±4)%(P<0.05),加入自噬抑制剂3-MA后细胞凋亡率上升至(36±3)%(P<0.05)。结论 在缺乏营养的状态下,下调ASPP2可能通过调节自噬促进肝癌细胞的增殖和存活。

摘要:目的 研究肿瘤坏死因子α(TNF-α)对肝癌细胞上皮间质转化(EMT)的影响并探讨其分子机制。方法 用TNF-α处理人肝癌细胞株 (Hep3B和SMMC-7721) 24 h,倒置显微镜下观察处理前后细胞形态的变化,采用荧光定量RT-PCR和蛋白质印迹分析方法检测细胞中上皮细胞标记物上皮性钙黏蛋白(E-cadherin)和β-连环素(β-catenin)、间质细胞标记物波形蛋白(Vimentin)和神经性钙黏蛋白(N-cadherin)以及转录调控因子Twist的表达变化,Transwell及划痕实验分析细胞的侵袭能力。随后采用荧光素酶报告基因系统和细胞免疫荧光评估TNF-α对核因子κB(NF-κB)的激活作用；蛋白质印迹分析检测IκBα及p-IκBα蛋白表达水平。TNF-α联合应用NF-κB 抑制剂后,检测细胞EMT表型变化。结果 Hep3B和SMMC-7721细胞用TNF-α处理后,表现EMT的表型;细胞的划痕愈合率明显大于未处理组(P<0.05),Transwell 实验显示细胞穿透膜的数量亦显著增多(P<0.05)。TNF-α能有效激活NF-κB报告基因,促进NF-κB p65核转位及IκBα的磷酸化。应用NF-κB抑制剂BAY11-7082能够逆转TNF-α诱导EMT的作用(P<0.05)。结论 TNF-α通过NF-κB依赖性途径诱导肝癌细胞发生EMT,进而促进肝癌的侵袭转移。

摘要:目的 筛选并分析烟雾病microRNA(miRNA)表达谱,探讨其可能的发病机制。方法 采用基因芯片检测10例烟雾病患者和10例正常对照血清,获得miRNA差异表达谱,用RT-PCR进行结果验证。通过目标预测程序TargetScan进行预测并得到差异表达的miRNAs。进一步通过基因本体论(GO)分析与通路分析诠释关键信号通路和可能参与烟雾病发病机制的miRNAs。结果 根据基因芯片结果,发现有94个差异表达的miRNAs,其中上调50个,下调44个,若干个重要的miRNA家族亦同时被检测到。RT-PCR验证了miRNA-106b、miRNA-130a、miRNA-126、miRNA-125a-3p的差异表达,证明基因芯片筛查可靠。通路分析表明富集程度最高的是mTOR信号通路,具有16个潜在功能靶点。结论 利用基因芯片初步筛选出烟雾病患者血清miRNA表达谱；生物信息学分析提示mTOR信号通路可能与烟雾病发病相关。

摘要:目的 建立动脉粥样硬化易损斑块(VP)模型, 并静脉输注骨髓间充质干细胞(MSCs), 验证MSCs对VP稳定性的影响。方法 雄性新西兰兔24只, 随机分为3组,VP组(n=8)制作VP模型;VP+MSCs组(n=8) 制作VP模型后即刻静脉输注1×10⁷ MSCs;SP组(n=8)制作稳定斑块模型。12周末处死所有动物, 取右侧颈总动脉行H-E染色和Masson染色, 并测量纤维帽厚度和脂核横截面厚度的比值。行免疫组化染色检测斑块内基质金属蛋白酶2(MMP-2)的含量。结果 H-E染色结果:VP组斑块中心可见大量脂核, 斑块表面覆盖较薄纤维帽, 在斑块肩部可见残存泡沫细胞和大量炎细胞浸润, 部分斑块可见破裂及(或)血栓形成;SP组镜下可见粥样硬化斑块形态结构完整, 纤维帽较厚, 斑块内炎细胞较少, 未见斑块破裂;VP+MSCs组形态介于两者之间。帽/核比值SP组>VP+MSCs组>VP组, VP组与VP+MSCs组和SP组比较差异有统计学意义(P<0.01)。Masson染色结果:SP组平滑肌细胞和弹力纤维含量高于其他两组, VP+MSCs组次之, VP组最少。斑块内MMP-2表达水平: VP组斑块内MMP-2大量表达, 主要位于纤维帽和脂质核心;与VP组相比, VP+MSCs组和SP组MMP-2的表达减少, 差异有统计学意义(P<0. 01);VP+MSCs组MMP-2表达高于SP组(P<0. 01)。结论 MSCs静脉输注干预兔VP模型, 可降低斑块不稳定性, 其机制可能与减少炎性细胞聚集、降低MMP-2含量、减少胶原纤维降解有关。

摘要:目的 探讨组胺和类胰蛋白酶在慢性胰腺炎(CP)疼痛发生与维持中的作用。 方法 制备CP模型大鼠,检测模型组和对照组大鼠胰腺标本中的组胺和类胰蛋白酶含量并进行比较；然后将模型组和对照组大鼠胰腺标本孵育上清分别注射于正常大鼠足底,观察注射后0.5、1、3、5、7 h大鼠痛觉阈值变化；以模型组大鼠胰腺标本孵育上清注射正常大鼠足底,并给予H1受体阻断剂和蛋白酶抑制剂,观察其对痛敏的治疗作用。结果 CP模型大鼠的胰腺局部组胺及类胰蛋白酶分泌量较对照组增高(P<0.05),其标本孵育上清在注射后5 h内有明显的痛觉致敏作用,且该作用可被H1受体阻断剂和蛋白酶抑制剂所逆转。结论 组胺和类胰蛋白酶是CP顽固性疼痛发生维持中的重要介质。

摘要:目的 探讨固定时间热暴露对大鼠胸主动脉血管收缩特性的影响及机制。方法 选用雄性Wistar大鼠，随机分为对照组、随意时间热暴露组和固定时间热暴露组，环境温度24℃，热暴露温度为36℃，每天热暴露6 h。经7 d热暴露后,采用体温遥感技术监测大鼠体核温度变化；器官浴槽法测定大鼠胸主动脉对去甲肾上腺素(NA)的反应性；RT-PCR检测动脉血管内皮型一氧化氮合酶(eNOS) mRNA的表达水平及用试剂盒测定血浆中一氧化氮等离子体(NO_x) NO2-和NO3-的含量变化。结果 热暴露对大鼠的体核温度变化影响不大(P>0.05)；与对照组相比,固定时间热暴露组大鼠胸主动脉血管对NA的反应性降低(P<0.01);与对照组和随意时间热暴露组相比，固定时间热暴露组eNOS mRNA相对表达水平及血浆中NO_x的含量增加(P<0.05)。 结论 固定时间热暴露可改变大鼠胸主动脉血管的反应性,内皮细胞源性的NOS通路可能参与并诱导了血管舒张作用。

摘要:目的 探讨弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中遍在蛋白活化酶E1(UBE1)和凋亡抑制基因Bcl-2蛋白的表达及临床病理意义。 方法 收集80例DLBCL组织和30例良性淋巴组织反应性增生(RH),应用免疫组化技术(EnVision二步法)对DLBCL组织进行免疫分型并检测其免疫表型GCB型、ABC型中UBE1、Bcl-2蛋白的表达; 同时检测UBE1、Bcl-2蛋白在RH组织中的表达。分析UBE1、Bcl-2蛋白表达与DLBCL患者临床病理特征的关系,及DLBCL组织中UBE1与Bcl-2表达的相关性。 结果 DLBCL组织中UBE1阳性表达率为65.0%(52/80),RH组织中阳性表达率为13.3%(4/30),两者差异具有统计学意义(P<0.05);GCB型和ABC型的阳性表达率分别为53.3%(16/30)、72.0%(36/50),两者差异具有统计学意义(P<0.05)。DLBCL组织中Bcl-2阳性表达率为51.3%(41/80),RH组织中阳性表达率为10.0%(3/30),两者差异具有统计学意义(P<0.05);GCB型和ABC型的阳性表达率分别为36.7%(11/30)、60.0%(30/50),两者差异具有统计学意义(P<0.05)。在DLBCL组织中,UBE1的阳性表达率与患者的年龄、累及结外数目有关(P<0.05); Bcl-2的阳性表达率与DLBCL患者的年龄、Ann Arbor分期、累及结外数目、国际预后指数等病理特征有关(P<0.05)。UBE1在ABC型中的表达与Bcl-2的表达呈正相关(r=0.582, P=0.001)。结论 UBE1、Bcl-2蛋白在DLBCL的ABC型中表达较高,在肿瘤的发生、发展及侵袭中起着一定的作用,UBE1与Bcl-2蛋白的高表达可能提示DLBCL患者的不良预后。

摘要:目的 探讨一种新的利用射频消融进行局部去交感神经的方法,并观察其对心脏电生理及程控心律失常诱发的影响。方法 18只杂种犬结扎冠状动脉第一对角支建立心肌梗死模型,之后沿冠状动脉左前降支均匀地自上而下行6个点射频放电消融(每点8 W，2 min)。所有实验动物均在心肌梗死后局部去神经前及去神经后通过S1S2程控刺激测定左心室表面6个部位的有效不应期(心梗上区域、心梗区域及心梗下区域各2个部位)，并行短阵刺激诱发室性心律失常，记录诱发的心律失常数目。结果 沿冠状动脉消融后,左心室各部位有效不应期显著延长\[(191.3±24.9) ms vs (209.0±27.2) ms, P/em><0.05\]。缺血区域有效不应期延长的时间\[(11.3±8.8) ms\]较缺血区域以上\[(23.2±10.2) ms\]及缺血区域以下\[(18.7±11.5) ms\]短(P/em><0.05)。消融前11只能诱发室性心律失常的犬中，消融后有8只未能再诱发心律失常，3只仍能诱发心律失常;心律失常的诱发率由61.1%(11/18)下降到16.7%(3/18;P=0.007)。结论 本研究建立的方法可能是减少急性心肌梗死行经皮冠状动脉造影患者心律失常发生的一个可行方法。