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| 目的:分析细胞因子对外周血单核细胞LIGHT基因的诱导表达,并克隆人LIGHT基因.方法:采用新鲜健康人外周血单核细胞(PM BC),分别以LPS、TNFα、IL-2、IFN-γ及PMA刺激以诱导LIGHT基因表达,RT-PCR分析P MBC内LIGHT基因转录表达.采用PCR产物直接克隆法克隆人全长LIGHT基因及其胞外区编码基因,并对胞外区编码基因进行大肠杆菌表达.结果:当用IFN-γ和PM A刺激PMBC后48 h,可诱导LIGHT基因的明显表达,而LPS、IL-2和TNFα则不能诱导.克隆的人LIGHT全长基因及LIGHT胞外区编码基因,经过DNA序列测定证实基因序列与文献报道一致.LIGHT基因胞外区在大肠杆菌获得一定程度的表达.结论:本研究对人LIGHT基因及其胞外区编码基因进行了克隆和表达,为进一步研究其功能打下基础. |
| 关键词: LIGHT、TNF超家族、RT-PCR、基因克隆、基因表达 |
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| Cloning and induced expression of LIGHT in peripheral blood lymphoctye |
| 娄永华,焦炳华 |
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