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| 人外周血单个核细胞BLyS127-285的克隆、表达和纯化 |
| 周演武,谢菲,周琳,娄加陶,侯彦强,耿红莲,仲人前 |
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| (第二军医大学长征医院实验诊断科,上海,200003;上海市杨思医院检验科,上海,200126) |
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| 目的:从人外周血单个核细胞中克隆出B淋巴细胞刺激因子(B lymphocyte stimulator,BLyS)胞外区片段BLyS127-285,并进行表达和纯化.方法:采用RT-PCR技术,从人外周血单个核细胞中扩增BLyS127-285,测序后构建原核表达载体,经IPTG诱导表达及Ni-NTA纯化,以SDS-PAGE和Western印迹法进行鉴定.结果:RT-PCR扩增出一个480 bp的DNA片段,序列分析与GenBank中报道的人BLyS127-285的cDNA序列一致,该胞外区片段在大肠杆菌中得到高效表达,表达量可达菌体总蛋白的49.8%,纯化后纯度可达97.0%.结论:成功地从人外周血单个核细胞中扩增出人BLyS127-285,并获得高效表达,其纯化产物为进一步研究其功能、开发与临床应用奠定了基础. |
| 关键词: 人外周血单个核细胞、BLyS127-285、基因表达 |
| DOI：10.3724/SP.J.1008.2004.01335 |
| 投稿时间：2004-07-23修订日期：2004-10-28 |
| 基金项目:国家自然科学基金(30080027)、上海市重点基础研究项目(02JC14005)、上海市卫生系统"百人计划"(沪卫科9713) |
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| Cloning,expression and purification of human BLyS127-285 from peripheral blood mononuclear cells |
| 周演武,谢菲,周琳,娄加陶,侯彦强,耿红莲,仲人前 |
| (第二军医大学长征医院实验诊断科,上海,200003;上海市杨思医院检验科,上海,200126) |
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| Key words: |
