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| 人骨形态发生蛋白7重组腺病毒的制备及在骨髓基质干细胞中的表达 |
| 毕霞,徐卫东,吴岳嵩,龚德军,袁扬,黄盛东 |
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| (第二军医大学长海医院康复医学科,上海,200433;第二军医大学长海医院骨科,上海,200433;第二军医大学长海医院胸心外科,上海,200433) |
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| 摘要: |
| 目的:构建骨形态发生蛋白7(BMP-7)和绿色荧光蛋白(GFP)融合基因的重组腺病毒载体,并检测其在骨髓基质干细胞(BMSCs)的表达.方法:RT-PCR法获得BMP-7基因.将其克隆至pcDNA3.1/CT-GFP质粒中,PCR扩增hBMP-7/GFP融合基因片段,与线性化pAxCAwt腺病毒载体连接,转染大肠杆菌LE392,筛选重组腺病毒黏粒,大量扩增后与DNA-TPC共转HEK293细胞,获得重组腺病毒Ad.hBMP-7/GFP.用重组病毒液转染兔BMSCs细胞,免疫组化方法检测BMP-7的表达.结果:经过多聚酶链反应及酶切鉴定证明获得了BMP-7重组腺病毒基因组,并包装出重组腺病毒,滴度为4.4×108pfu/ml.荧光显微镜和免疫组织化学证明BMP-7在重组腺病毒转染后的BMSC细胞中得到了表达.结论:成功制备BMP-7重组腺病毒,为骨缺损局部基因治疗研究奠定基础. |
| 关键词: 骨形态发生蛋白质类、重组腺病毒、骨髓祖代细胞 |
| DOI：10.3724/SP.J.1008.2006.01023 |
| 投稿时间：2006-01-14修订日期：2006-06-07 |
| 基金项目:上海市科委基金(024119111). |
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| Construction of recombinant adenovirus carrying human bone morphogenetic protein-7 and its expression in bone marrow stromal cells |
| 毕霞,徐卫东,吴岳嵩,龚德军,袁扬,黄盛东 |
| (第二军医大学长海医院康复医学科,上海,200433) |
| Abstract: |
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| Key words: |
