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| 新型噬菌粒展示载体pCANTAB5L的构建 |
| 沈毅珺;潘卫;易进华;徐容;陈秋莉;潘欣;冯春芝;邓松华;戚中田;刘彦君 |
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| (第二军医大学基础医学部微生物学教研室,第二军医大学基础医学部微生物学教研室,上海复旦张江生物医药股份有限公司 ,安徽医科大学病理生理学教研室 ,第二军医大学基础医学部微生物学教研室,第二军医大学基础医学部微生物学教研室,第二军医大学基础医学部微生物学教研室,安徽医科大学病理生理学教研室 ,第二军医大学基础医学部微生物学教研室,上海复旦张江生物医药股份有限公司 上海200433上海复旦张江生物医药股份有限公司 ,上海200433 ,上海200433 ,上海200433 ,...) |
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| 摘要: |
| 目的 :将柔性多肽接头和多克隆位点引入噬菌粒载体 pCANTAB5X中 ,构建适用于展示各种随机肽库、功能靶蛋白、功能靶蛋白变异体库和大分子量 (>30 0个氨基酸 )功能蛋白的新型噬菌粒展示载体。 方法 :应用 5′端含XbaⅠ、StuⅠ、SalⅠ、KpnⅠ识别序列的引物 ,PCR扩增获得XbaⅠ StuⅠ SalⅠ KpnⅠ [G4S]3 NotⅠ衔接片段 ,将该PCR产物克隆到pMD 18T中 ,再将该片段插入 pCANTAB 5X中构建成新型噬菌粒展示载体 pCANTAB5L。 结果 :限制性内切酶酶谱及DNA序列分析证明[G4S]3多肽接头和限制性内酶切位点XbaⅠ、StuⅠ、SalⅠ、KpnⅠ序列被引入到新构建的噬菌粒载体pCANTAB 5L中。 结论 :成功构建了新型噬菌粒展示载体 pCANTAB5L ,并能有效展示功能靶蛋白、功能靶蛋白变异体库和大分子量功能蛋白 |
| 关键词: 噬菌体展示 噬菌粒载体 多克隆位点 多肽接头 |
| DOI： |
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