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SARS相关冠状病毒S1融合蛋白的原核表达与纯化 |
张术;王开宇;郭瀛军;黄力;陈祖欢;朱维佳;孙树汉 |
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(第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室,第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室,第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室,第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室,第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室,第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室,第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室 上海200433 ,上海200433 ,上海200433 ,上海200433 ,上海200433 ,上海200433 ,上海200433) |
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摘要: |
目的 :克隆严重急性呼吸综合征相关冠状病毒 (SARS- Co V) S1蛋白编码 DNA,构建原核表达质粒 p GEX- 5 T/ S1,并诱导表达谷胱甘肽巯基转移酶融合蛋白。方法 :采用 PCR方法扩增合成 S1片段 ,并克隆入载体中 ,经双酶切鉴定和测序后把S1序列定向插入原核表达载体 p GEX- 5 T的多克隆位点 ,转化大肠杆菌 K80 2 ,将纯化后的融合蛋白用于 SARS- Co V抗体阳性血清的检测。结果 :GST- S1融合蛋白以可溶形式表达 ,纯化后的蛋白用 EL ISA法检测 ,结果与对照相符。结论 :成功诱导原核表达并纯化出融合蛋白 S1,为将其应用于 SARS- Co V的特异性检测和亚单位疫苗研究奠定了基础 |
关键词: 严重急性呼吸综合征 冠状病毒 S1融合蛋白 表达 纯化 |
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