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抗阿尔茨海默病重组真核表达载体的构建 |
何颖;黄力;章亚男;黎怀星;陈蕊雯;孙树汉 |
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(第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室,第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室,第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室,第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室,第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室,第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室 上海200433 ,上海200433 ,上海200433 ,上海200433 ,上海200433 ,上海200433) |
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摘要: |
目的 :将淀粉样蛋白 N端的抗原表位基因以 4种不同的组合与小鼠 Ig G重链区基因融合 ,构建抗阿尔茨海默病的重组质粒。方法 :通过 RT- PCR技术从小鼠脾组织中克隆 Ig G重链区 c DNA,将柔性接头与抗原表位基因序列设计在 5′端引物中 ,然后以克隆出的小鼠 Ig G重链区 c DNA为模板 ,用 PCR法克隆出由柔性接头将抗原表位和 Ig G重链区基因融合在一起的序列 ,并插入到 p VAX质粒载体中。结果 :扩增出来的 4种不同组合的抗原表位基因和 Ig G重链区基因融合序列大小分别为 999、1 0 2 0、1 0 0 5、1 0 2 6 bp,均与 Gen Bank上登录的相符 ;p VAX重组质粒酶切结果表明融合基因正确地插入到 p VAX载体中 ,全自动测序亦显示抗原表位基因和 Ig G重链区基因为所需基因 ,接头序列也完全正确。结论 :成功构建了抗阿尔茨海默病的 4种表位基因 - Ig G重链区融合表达的重组质粒 ,为探索防治阿尔茨海默病打下基础 |
关键词: 阿尔茨海默病 表位 IgG重链区 重组真核表达载体 |
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