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| 目的:建立稳定表达人FcγRⅡ(human Fc gamma receptor Ⅱ ,huFcγRⅡ)的真核细胞系，为后续研究奠定基础。方法:采用RT-PCR方法从人外周血白细胞合成FcγRⅡcDNA，构建huFcγRⅡ表达质粒pcDNA3-huFcγRⅡ，经酶切和PCR鉴定后，将pcDNA3-huFcγRⅡ质粒通过脂质体转染法转染COS7细胞，并经G418筛选获得稳定表达huFcγRⅡ的细胞克隆。采用免疫荧光法和玫瑰花环试验检测huFcγRⅡ的表达。结果:构建的pcDNA3-huFcγRⅡ真核表达质粒经酶切鉴定与预期一致，稳定转入COS7细胞后，经免疫荧光染色，约90%的转染细胞可见荧光，而未转染的COS7对照细胞未见荧光。结论:成功构建pcDNA3-huFcγRⅡ真核表达质粒，建立了稳定表达huFcγRⅡ的细胞系，为进一步研究奠定了基础。 |
| 关键词: huFcγRⅡ受体 COS7细胞 免疫荧光检测 玫瑰花环试验 |
| DOI：10.3724/SP.J.1008.2008.01110 |
| 投稿时间：2008-02-25修订日期：2008-06-12 |
| 基金项目:国家自然科学基金(30730068)，国家重点基础研究发展计划(“973”计划，2005CB523200). |
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| Construction of eukaryotic expression plasmid of human FcγRⅡand establishment of cell line stably transfected with the constructed plasmid |
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| (College of Animal Science and Veterinary Medicine, Jilin University) |
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