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| 【立论依据】 在中医滋阴活血理论的指导下,采用具有滋阴活血作用的补肾活血方对卵巢早衰小鼠进行研究,检测其卵泡颗粒细胞凋亡情况,阐明滋阴活血法对卵泡颗粒细胞凋亡影响的机制,为临床治疗卵巢早衰提供新的方法思路。 【设计思路】 (1)以雷公藤多甙片造成卵巢早衰为模型,随机将清洁级雌性小鼠分为空白组、模型组、西药物组、中药组。(2)给药:根据小鼠与人的体表面积进行换算后灌胃给药治疗15 d。(3)指标检测:摘取卵巢,子宫,胸腺组织称重计算脏器指数;病理形态学观察卵巢内正常卵泡和闭锁卵泡的形态变化;放免法检测E2、FSH、LH激素水平;RT-PCR法检测Fas和Fas-L的mRNA表达情况。 【实验内容】 研究滋阴活血法对卵巢早衰小鼠卵泡的作用;对卵巢早衰小鼠卵巢、子宫脏器指数的干预;对卵巢早衰小鼠E2、FSH、LH激素水平的调节;对卵巢早衰小鼠 Fas和Fas-L的mRNA表达的影响。 【材料】 清洁级雌性小鼠;药物:补肾活血方组药、补佳乐、雷公藤;灌胃针、离心机、清洁试验台、RNA提取试剂盒、PCR仪、移液器等。 【可行性】 (1)补肾活血方具有补肾、活血、软坚的功效,可改善肾虚血淤所致病理变化,具有调节下丘脑-垂体-卵巢-性腺轴,促进卵巢分泌E2,抑制卵巢卵泡细胞凋亡,增强机体免疫力等作用。(2)本组成员跟随老师进行课题研究,具有一定的科研基础和实验能力,并已学习过生化、免疫,组胚及病理学课程,掌握了与本项目密切相关的形态学、免疫组织、分子生物学技术。(3)所需试剂、仪器、材料,医学基础实验中心基本都有配备,这为研究提供了硬件的保障,同时具备SPF级实验中心。 【创新性】 (1)治法新用:该研究从滋补肝肾阴虚,养血活血着手研究凋亡机制,为临床治疗卵巢早衰提供新的思路。(2)Fas/Fas-L介导的凋亡新用。 |
| 关键词: 滋阴活血法 卵巢早衰 颗粒细胞 凋亡 |
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