【立论依据】 全方提取组与模型组比较,全方提取组能够显著增加大鼠TGF-β1 mRNA、I型胶原mRNA的平均面密度(P<0.05)。空白组与假手术组大鼠的TGF-β1 mRNA、I型胶原mRNA的平均面密度均匀正常,全方提取组与空白组和假手术组大鼠的TGF-β1 mRNA、I型胶原mRNA的平均面密度基本一致。 【设计思路】 60只3个月龄雌性SD大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、全方提取组四组,15只/组,除空白组及假手术组外,其余组去势(去卵巢)后建立绝经后骨质疏松症模型大鼠,假手术组则去除卵巢周边相应体积的脂肪。大鼠皆灌胃13周后处死取材,采用原位杂交法检测I型胶原mRNA、TGF-β1mRNA在骨组织中的表达。 【材料】 实验动物与材料:SPF级3个月龄250 g左右雌性SD大鼠60只,由广东省医学实验动物中心提供(动物合格证号:SCXK(粤)2008-0002)。饲料为标准普通饲料(湖南中医药大学实验动物中心提供)。药品及试剂:壮骨止痛方全方提取物(由中南大学药理学实验室提供);E2(批号:HY-032)放免试剂盒(北京华英生物技术研究所);TGF-β1 mRNA原位杂交试剂盒(批号:MK1065)、I型胶原纤维mRNA原位杂交试剂盒(批号:MK1171),DAB显色试剂盒(批号:AR1022),均购自武汉博士德生物有限公司。主要仪器:JY3002型电子天平、超低温冰箱、LEICA DM LB2型双目显微镜、HHS-2电子恒温不锈钢水浴锅、Haier医用微波炉、MIAS医学图象分析系统、Motic B5 显微摄像系统等。 【可行性】 本项目所用实验室为国家中医药科研三级实验室,具备进行药物准备、动物造模、指标检测等方面的仪器与条件;学校动物实验中心免费为大学生提供创新性学习实验提供场地并且本实验是在指导教师悉心指导下完成的;理论和实践上都具备可行性。 【创新性】 探讨壮骨止痛方抗骨质疏松的作用机制,弥补国内对这方面研究的空缺;本实验研究的出发点是中药方剂壮骨止痛方的开发,学生创新性学习与研究密切关注祖国中药发展,充分调动了学生的自学能力和科学研究能力的培养。