【立论依据】 原发性肝癌是最常见的恶性肿瘤之一,其全球发病率及死亡率分别居于恶性肿瘤的第5位和第3位。诸多研究显示,趋化因子与肿瘤细胞的增殖、运动、迁移和特异性器官转移有关,每年至少有20种肿瘤和15%的新发恶性肿瘤是由趋化因子介导的炎症反应进一步演化而来的。因此,趋化因子在肿瘤的发生、发展及其演进中的作用已越来越引起人们的关注。 【设计思路】 本研究拟开展CXCL5在肝癌中的表达及其功能研究,以期为人类对肝癌发生机理的认识提供新的理论依据,为临床治疗肝癌提供新的靶点。 【实验内容】 (1)RT-PCR和蛋白质印迹法检测CXCL5及其受体CXCR2在肝癌细胞株HEPG2的表达。(2)免疫组化方法在组织芯片上检测CXCL5在肝癌和癌旁组织中的表达情况。(3)外源性CXCL5对HEPG2细胞致癌潜能的影响。(4)建立稳定转染CXCL5的HEPG2细胞株和肝间质细胞株,研究CXCL5通过自分泌和旁分泌对HEPG2细胞致癌潜能的影响。(5)利用基因芯片和RT-PCR技术检测CXCL5表达调控基因。 【材料】 HEPG2细胞、慢病毒包装试剂盒、重组人CXCL5、鼠抗人CXCL5抗体、兔抗人CXCR2抗体、 MTT试剂盒、基因芯片、组织芯片等。 【可行性】 本研究是佳木斯大学大学生科技创新项目重点项目,指导教师具有多年从事该领域研究的经验,前期的部分预实验结果显示重组人CXCL5可明显促进HEPG2细胞的增殖、迁移和克隆形成能力,故该项目立题依据充分,理论上是可行的。本研究的实验方法是基于指导教师多年的经验所证实的行之有效的方法,并且这些方法在国内外肿瘤研究中被广泛应用,故方法上是可行的。 【创新性】 本研究首次开展间质细胞过表达CXCL5通过旁分泌对肝癌细胞致癌潜能的影响,该研究可为肝癌的治疗提供新的思路,即切断间质微环境中某些促瘤组分与癌上皮的联系,很可能对癌症的治疗起到意想不到的效果。