【立论依据】 卡氏肺孢子菌肺炎(pneumocystis carinii pneumonia,PCP)是由肺孢子菌引起的急性肺炎,多为免疫力缺陷患者的肺部机会性感染。阿里红(fomes oficinalis sporophore),新疆维吾尔族医药志记载主要用于治疗慢性支气管炎、感冒、肺结核和癌症等,对机体免疫功能有调节作用,目前国内外尚无阿里红多糖抗机会致病菌的研究报道。 【设计思路】 本研究通过维吾尔药阿里红多糖及其联合复方磺胺甲噁唑对PCP大鼠模型的治疗效果,及流式细胞术分析维吾尔药阿里红多糖对T细胞亚群及相关细胞因子变化,探讨其治疗大鼠PCP的免疫机制,为该药的临床应用和开发提供实验依据。 【实验内容】 将SD大鼠随机分为正常组、PCP组、复方磺胺甲噁唑治疗组、阿里红多糖高低剂量组和联合用药高低剂量组。六胺银染色确定其PCP的程度;H-E观察肺组织病理改变;免疫组化观察病灶周围的炎症因子变化;CBA法检测外周血中Th1的IFN-γ和IL-2、Th2的IL-4、Treg的 IL-10、Th17的IL-17、以及趋化因子IL-8、IL-6及TNF-a变化;流式细胞术检测负性细胞调节分子PD-1和T细胞亚群的变化,深入探讨维吾尔药阿里红多糖治疗大鼠PCP的免疫机制。 【材料】 CBA试剂盒、PD-1和T细胞亚群等的流式细胞术检测试剂、六胺银、成年SD大鼠、阿里红多糖、复方磺胺甲噁唑等。 【可行性】 预实验结果:肺组织病理观察,感染组肺泡腔扩大,有泡沫状或蜂窝样渗出物,肺泡间隔增宽,肺上皮细胞增生、增厚,淋巴细胞、浆细胞等细胞浸润,六胺银染色也确定PCP大鼠模型建立成功。阿里红多糖联合用药组治疗效果好,炎性细胞减少,病理改变较PCP组明显减轻;CBA法结果发现感染组大鼠外周血中IL-8升高, IL-6、TNF-α均降低,而各治疗组TNF-α和IL-6均升高、IL-8降低。前期结果表明阿里红多糖及联合用药对PCP有明显的治疗效果,很可能是通过改变细胞因子发挥其治疗作用。为了进一步解释其免疫机制,很有必要开展外周血中Th1/Th2、Th17/Treg细胞及相关因子变化研究,尤其是负性细胞调节分子PD-1的含量变化,分析该药是否是通过影响T细胞平衡和功能发挥其治疗作用。 【创新性】 维吾尔药阿里红多糖抗PCP感染国内外尚未见报道,将阿里红多糖及联合复方磺胺甲噁唑应用于大鼠PCP动物模型,通过分析Th1/Th2、Th17/Treg细胞平衡改变和细胞因子变化,探讨该药的治疗机制,为PCP的治疗探索新途径,也为新疆特色维吾尔药的开发奠定实验基础。