【立论依据】 Sihler's肌内神经染色法可在保持肌肉完整的情况下,肉眼清晰地观察肌内神经的三维分支分布规律。然而,关于皮肤内神经的分布,目前只是一些组织学上的证据。本小组曾用该法染色皮肤内神经,试图通过肉眼就能观察到皮肤内神经的分布规律,但尚未使之浸解透明。有资料表明:提升氢氧化钾和过氧化氢的浓度可加强皮肤漂白和缩短时间;皮肤内富含大量Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白,是否因为这些胶原蛋白阻碍了浸解步骤?我们曾用20%硫酸浸解肌块3 d后,肌块软化并能顺利分出完整的单根肌纤维。为此,本研究拟改良Sihler's肌内神经染色法的浸解步骤,使皮肤浸解透明,希望通过肉眼就能观察到皮肤内的神经分布规律,以期为临床上神经损伤及麻醉的定位提供解剖学依据。 【设计思路】 本研究拟设计:(1)3%氢氧化钾和3%过氧化氢浸解皮肤4周,常规的Sihler's染色法步骤和浸解浓度作对照;(2)先用5%氢氧化钾和8%过氧化氢浸解皮肤2周,再加入0.25%的Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白酶和0.25%胰酶浸解2周;(3)在5%氢氧化钾和8%过氧化氢溶液中同时加入0.25%Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白酶和胰酶浸解皮肤4周;(4)皮肤先置入20%的硫酸浸泡3 d,再5%氢氧化钾和8%过氧化氢浸解4周。改良目的是促进皮肤透明。待皮肤透明后,续以下Sihler's染色步骤,即脱钙、染色、脱色、中和、透明等。 【实验内容】 改良Sihler's肌内神经染色法显示人体躯干、四肢等处皮肤内的神经分布。 【材料】 陈尸上的胸部、腹部、手掌面、大腿等处的皮肤;改良Sihler's染色法所需试剂。 【可行性】 本小组曾用Sihler's肌内神经染色法清晰显示肌内神经分布,对该方法有很深入的了解;方案的提出是在前期工作积累、预实验以及阅读了国内外大量资料的基础上设计的;已进入正式实验,出现了改良后皮肤质地较软和能被透明的征象,能达到预期目的。 【创新性】 清晰显示皮肤内神经的分布规律,提供前所未有、肉眼可见的解剖学证据,为临床上神经损伤及麻醉的定位提供科学依据。