Abstract:本文在回顾国内外涎腺腺样囊性癌研究的基础上,提出了腺样囊性癌研究中的几个热点问题:(1)腺样囊性癌的嗜神经侵袭特性;(2)腺样囊性癌的远处转移;(3)腺样囊性癌治疗的展望.

Abstract:目的:建立腺样囊性癌(ACC)神经侵袭的动物模型.方法:将5×105人涎腺腺样囊性癌ACC-M细胞注射入30只裸鼠一侧眶下区皮下,分别于7、11、14、21、28 d、动物自行死亡时或56 d采集标本,H-E染色观察肿瘤能否侵袭眶下神经并测量神经侵袭的长度.另取16只裸鼠,随机分为2组,分别将ACC-M和人舌癌Tca-8113细胞注射入裸鼠眶下点皮下,14 d后H-E染色观察肿瘤生长和眶下管内神经侵袭的情况,比较两组神经侵袭的发生率.结果:30只裸鼠模型中23只出现了神经侵袭,7、11、14、21、28 d和自行死亡组神经侵袭长度分别为0.09、(0.27±0.02)、(0.38±0.05)、(0.68±0.18)、(1.07±0.36)和(2.10±0.77) mm.另16只裸鼠中8只ACC-M细胞注射裸鼠神经侵袭发生率为100％,远高于Tca-8113细胞注射裸鼠的12.5％(P<0.01).结论:该模型具备良好的可行性、特异性,是腺样囊性癌神经侵袭的良好研究平台.

Abstract:目的:研究肌上皮细胞标记物--肌动蛋白(MA)和神经膜细胞标志物--神经细丝酸性蛋白(GFAP)在腺样囊性癌中的表达,探讨腺样囊性癌中神经膜细胞分化与肌上皮细胞的关系.方法:利用免疫电镜技术从超微结构水平研究MA 和GFAP在腺样囊性癌中的表达.结果: MA主要表达于腺样囊性癌的细胞质中,GFAP表达于腺样囊性癌的细胞质和细胞核上.MA阳性细胞与GFAP阳性细胞具有相似的超微结构.GFAP阳性细胞的超微结构符合肌上皮细胞的超微结构特点.结论:发生神经膜细胞分化的腺样囊性癌细胞是其中的肌上皮成分.

Abstract:目的:探讨S100蛋白在腺样囊性癌中表达的准确定位,为揭示腺样囊性癌嗜神经侵袭的机制提供实验依据.方法:利用双重免疫荧光染色及激光共聚焦显微镜技术检测肌上皮细胞标记物肌动蛋白(MA)和神经膜细胞标记物S100蛋白在腺样囊性癌中的共表达.结果: MA主要表达于腺样囊性癌细胞的细胞质中,S100蛋白则主要表达于腺样囊性癌的细胞核中.激光共聚焦扫描后发现,MA与S100蛋白在同一种腺样囊性癌细胞中表达.结论:S100蛋白表达于腺样囊性癌的肌上皮细胞中,推测这些突变的肌上皮细胞可能发生了神经膜细胞分化.

Abstract:目的:通过检测神经生长因子(NGF)在体外体内腺样囊性癌(ACC)中的表达探讨NGF与ACC神经侵袭的关系.方法:采用Western印迹技术检测体外培养增殖期ACC-M中NGF的表达.采用免疫组化的方法检测14 d ACC眶下神经侵袭的裸鼠模型中ACC-M癌组织和眶下神经的NGF表达;比较邻近神经的ACC癌组织与远离神经的癌组织中NGF阳性表达细胞的密度;比较侵袭侧与非侵袭侧眶下神经NGF阳性染色的灰度值.结果:NGF在体内、体外ACC细胞中均有表达. NGF阳性表达细胞的密度在邻近神经的ACC中为30.67±5.91,远离神经的ACC中为9.33±2.81,两者相差显著(P<0.01).受侵袭侧与非侵袭侧眶下神经NGF阳性染色的灰度值分别为46.79±2.91和47.01±2.56,无显著差异(P＝0.299).结论:NGF参与ACC细胞的增殖,ACC中NGF表达增强与神经侵袭显著相关.

Abstract:目的:观察趋化因子受体CXCR4在涎腺腺样囊性癌(adenoid cystic carcinoma,ACC)肺高、低转移细胞株中的表达,探讨趋化因子受体CXCR4表达在ACC肺侵袭转移中的作用.方法:选取ACC肺高转移细胞株(ACC-M)和低转移细胞株(ACC-2)以及舌癌-8113细胞株(Tca-8113),分别应用单克隆抗体免疫荧光标记流式细胞术和Western印迹检测CXCR4在上述3种细胞中的表达.结果:3种细胞表面均有CXCR4受体的表达,其中ACC肺高转移细胞株ACC-M表达阳性率为(77.32±6.96)％,显著高于肺低转移细胞株ACC-2的(35.32±6.71)％和舌癌Tca-8113细胞株的(33.82±5.56)％,(P<0.05).Western印迹结果证实3种细胞株均有特征性的蛋白质表达条带,其中ACC-M的蛋白质表达条带最为显著.结论:趋化因子受体CXCR4在ACC肺高转移细胞株中高表达,提示CXCR4可能与ACC嗜肺转移的生物学特性有关.

Abstract:目的:观察构建含有Tip30与人IFN-γ基因的真核表达及共表达质粒的重组减毒沙门菌对腺样囊性癌荷瘤裸鼠肿瘤血管生成的抑制作用.方法:4周龄BALB/c nu nu雄鼠25只,随机分成5组,对照组(PBS组)、单纯减毒沙门菌组(SL7207组)、携带人IFN-γ基因减毒沙门菌治疗组(SL7207/pCI-IFN组)、携带Tip30基因减毒沙门菌治疗组(SL7207/pCI-Tip30组)、携带Tip30与人IFN-γ基因的真核共表达质粒的重组减毒沙门菌治疗组(SL7207/pCI-Tip30/IFN组),均于颌下接种腺样囊性癌(ACC-2)细胞.10 d后对照组裸鼠口服PBS,其余各治疗组口服相应的减毒沙门菌,隔周1次,共3次.然后检测肿瘤生长体积、带瘤存活期、裸鼠体内肿瘤的微血管密度(MVD).结果:各治疗组比较对照组、携带基因治疗组比较SL7207组、联合基因治疗组比较单基因治疗组肿瘤生长慢、体积小,带瘤存活期长(P<0.05);携带Tip30基因治疗组MVD较其他3组低,联合基因组较携带Tip30单基因组MVD低(P<0.05).结论:减毒沙门菌载体分别介导Tip30、IFN-γ基因有抑制肿瘤生长作用,联合基因较单基因治疗效果好,有协同作用.

Abstract:目的:观察抑癌基因Tip30联合紫杉醇抑制腺样囊性癌细胞ACC-2生长及特征性细胞核DNA变化.方法:待检ACC-2细胞分为4组:紫杉醇组、转基因组、紫杉醇+转基因组、空白对照组,采用MTT法检测细胞增殖率;DNA片段分析检测DNA裂解.结果:不同处理组检测结果分析显示,紫杉醇+Tip30组ACC-2细胞生长明显受到抑制,DNA裂解片段最为明显;单项处理组细胞生长亦受到抑制;对照组细胞生长未受影响.结论:Tip30联合紫杉醇可显著抑制ACC-2细胞生长,出现特征性DNA ladder现象.

Abstract:目的:观察SMMC-7721细胞在接受不同剂量60Co γ射线照射后线粒体DNA非编码区是否存在特定的断裂敏感点.方法:根据人线粒体DNA非编码区的基因序列设计相应的引物序列,再通过接头介导PCR(LM-PCR)及基因扫描来检测其断裂程度和位点.结果:PCR产物电泳结果显示,接受不同剂量γ射线照射后,各剂量都有相同大小的片段.通过基因扫描的方法,发现不同照射剂量下的断裂位点位置是相同的.结果说明这些断裂敏感位点不是随机分布的.并且,位点的损伤频率也是随着剂量的增加而呈现递增趋势,随着剂量的增加还出现了新的断裂位点. 结论:SMMC-7721细胞线粒体DNA非编码区确实存在对γ射线敏感的位点.

Abstract:目的:构建含突变C-kit基因cDNA的真核表达质粒并行进一步的功能分析.方法:用RT-PCR方法从人胎脑组织克隆野生型C-kit基因蛋白编码区cDNA.根据胃肠道间质瘤中检测出的C-kit基因突变序列,体外突变野生型C-kit cDNA得到突变型C-kit cDNA,与pcDNA3重组成真核表达质粒,并用脂质体法稳定转染人胚胎肾细胞(human embryonic kidney cell,HEK)293细胞系,G418加压筛选出阳性克隆;用Western印迹法检测转染细胞KIT蛋白表达,绘制细胞生长曲线,MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测转染HEK 细胞后细胞周期改变,并观察稳定转染突变型重组质粒人胚肾细胞在裸鼠内的成瘤性.分别设转染pcDNA3空白质粒和野生型的C-kit cDNA真核表达质粒的HEK细胞做为对照.结果:构建了突变型C-kit cDNA与pcDNA3的真核表达质粒; 功能检测分析表明:细胞生长曲线显示与对照组相比,实验组的生长速度明显增快;MTT比色显示,与对照组相比实验组细胞增殖活性显著增强;细胞周期检测结果显示,处于增殖期细胞(S+G2-M)比例显著高于对照组;体内结果显示转染突变型C-kit基因的HEK细胞在裸鼠体内成瘤.结论:C-kit原癌基因突变体可促使人类细胞生长加快,增殖活性明显增强,并可以使更多的细胞由静止期进入增殖期, 并可使人胚胎肾细胞发生恶性转化,提示C-kit基因突变有可能是引起胃肠道间质瘤恶性转化的关键机制之一.

Abstract:目的:构建THANK腺病毒载体,观察腺病毒感染后THANK在SMMC-7721细胞中的表达情况.方法:把THANK基因克隆入腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV中,与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1共转染大肠杆菌BJ5183,获得腺病毒重组质粒,再将获取的腺病毒重组质粒转染入293细胞进行包装,获取THANK重组腺病毒,以不同感染复数(MOI)腺病毒感染SMMC-7721细胞,观察腺病毒对SMMC-7721细胞的感染情况.结果:成功地构建了THANK腺病毒,该腺病毒可高效介导THANK在SMMC-7721细胞中表达,基因转染后第5天,THANK表达高于35 ng/ml,且随时间延长增加.结论:腺病毒可诱导THANK基因在SMMC-7721细胞中高表达.

Abstract:目的:研究糙海参(Holothuria scabra Jaeger)的三萜皂苷类抗癌活性成分.方法:应用大孔树脂柱层析、葡聚糖凝胶柱层析、正相硅胶柱层析、反相硅胶柱层析和HPLC进行三萜皂苷成分的分离纯化,根据化合物的理化性质和波谱数据鉴定其结构.并对提取到的化合物进行了稻瘟霉和体外细胞毒(针对MKN-45人胃癌肿瘤细胞和HCT-116人肠癌肿瘤细胞)的活性检测.结果:分离鉴定了5个三萜皂苷化合物,分别为24-dehydroechinoside A (1),echinoside B(2),echinoside A(3),holothurin B(4)和holothurin A(5).化合物1～5对稻瘟霉的最小活性浓度分别为＜7.9、＜15.7l、＜7.9、＜15.7、＜7.9 μg/ml,对MKN-45人胃癌肿瘤细胞的IC50值分别为1.60、0.18、1.86、1.59、2.37 μmol/L,对HCT-116人肠癌肿瘤细胞的IC50值分别为1.46、3.31、1.98、1.60、0.24 μmol/L.结论:化合物1为首次以原生产物形式得到的单体天然产物,2～5为首次从糙海参中分离得到.5个化合物均显示显著的体外细胞毒活性.

Abstract:目的:观察钾通道与肺动脉平滑肌细胞(PASMC)增殖和凋亡关系中钙通道所起的作用.方法:将PASMC分为对照、钾通道阻断剂四乙胺TEA (开放剂比那地尔Pin)、钾通道阻断剂(开放剂)+钙通道阻断剂硝苯地平Nif(开放剂Bay K8644)组,采用非核素增殖试剂盒、3H-TdR掺入测定细胞增殖.将PASMC分为对照、钾通道开放剂、钾通道开放剂+钙通道开放剂组,采用细胞凋亡检测试剂盒测定细胞凋亡.结果:与对照组相比,10～20 mmol/L的钾通道阻断剂TEA显著增加PASMC细胞数(P<0.01),15～30 mmol/L TEA显著增加DNA合成(P<0.05, P<0.01).TEA+5 μmol/L Nif组中只有20 mmol/L TEA使DNA合成增加(P<0.05),其余浓度组与对照组均无统计学差异.TEA+Nif组与TEA组相比,TEA浓度在10～25 mmol/L时2组细胞数相差显著(P<0.01),15～30 mmol/L TEA时2组DNA合成相差显著(P<0.05,P<0.01).与对照组相比,25～500 μmol/L Pin显著减少PASMC细胞数和DNA合成(P<0.01).Pin+1 μmol/L Bay组与Pin组相比,当Pin浓度为25～500 μmol/L时2组PASMC细胞数相差显著(P<0.01),当Pin浓度在50～500 μmol/L时DNA合成相差显著(P<0.01).Pin+Bay组与对照组相比,50～500 μmol/L的Pin仍能显著减少PASMC细胞数(P<0.01), 25～500 μmol/L的Pin显著减少DNA合成(P<0.01).与对照组相比,50～500 μmol/L的Pin显著增加PASMC凋亡率(P<0.05,P<0.01).Pin+1 μmol/L Bay组与Pin组相比,细胞凋亡率无显著差异.结论:钙通道在钾通道与PASMC增殖关系中起重要作用,但在钾通道与PASMC凋亡关系中无明显作用.

Abstract:目的:构建幽门螺杆菌(Hp)尿素酶亚单位B(UreB)、中性粒细胞激活蛋白(NAP)及黏附素A(HpaA)三价重组DNA疫苗并研究其抗原性,为Hp疫苗的开发奠定基础.方法:PCR扩增UreB、NAP、HpaA全长序列,分别克隆入pMD 18-T载体,测序并鉴定方向后依次连接,构建融合基因UNH,然后将其亚克隆入真核表达载体pIRES,以此转染COS-7细胞,Western印迹检测表达蛋白的抗原性.结果:PCR分别获得约1 707、432和750 bp产物,与GenBank中相关序列具有高度同源性,三者融合后获得一约2 901 bp目的基因.重组质粒pIRES-UNH转染COS-7细胞后表达相对分子质量约107 000的蛋白质,Western印迹显示该重组蛋白可为UreB、NAP、HpaA抗血清特异识别,具有良好的抗原性.结论:成功构建了具有良好免疫原性的UreB-NAP-HpaA三价重组DNA疫苗,为进一步探讨其免疫保护性及Hp疫苗的研制奠定了基础.

Abstract:目的:通过测定各种脂肪酸对体外培养的牛主动脉平滑肌细胞二脂酰甘油(DAG)和蛋白激酶C(PKC)水平的影响,探讨脂肪酸对动脉粥样硬化(AS)发生的可能作用机制.方法:分离牛主动脉平滑肌细胞在体外培养,分别用浓度为200 μmol/L的饱和脂肪酸软脂酸和硬脂酸、不饱和脂肪酸油酸和花生四烯酸处理后,然后将细胞分别用分离液和细胞裂解液处理,通过液闪计数仪测定32P-磷酸的cpm值(1 cpm=6.17×108 Bq),计算DAG和PKC.结果:饱和脂肪酸软脂酸和硬脂酸(200 μmol/L)分别作用24 h后,牛主动脉平滑肌细胞内的DAG水平分别为927.2和1 533.3 pmol/106个细胞,与对照组(190 pmol/106个细胞)有显著性差异(P<0.01).油酸增加细胞内DAG水平,为334.4 pmol/106个细胞(P<0.01).花生四烯酸对细胞内DAG含量无明显影响.酰基辅酶A抑制剂 Triacsin C能够完全抑制软脂酸对DAG的刺激作用.此外,软脂酸和硬脂酸均能刺激细胞内PKC活性,分别为553.7和557.2 cpm,对照组为394 cpm(P<0.05).结论:饱和脂肪酸可能通过其代谢产物酰基辅酶A促进主动脉平滑肌细胞内DAG的合成和提高PKC活性,这可能与AS有关.

Abstract:目的:研究在体脉动低切应力致实验兔颈总动脉粥样硬化(AS)的炎性反应机制.方法:结扎成年雄性新西兰白兔(体质量2.5～3.0 kg)的左颈外动脉获得左颈总动脉脉动低切应力;然后用高脂(含2％胆固醇)或普通饲料(100 g/d)养兔至2、4、8、12周,取下两侧颈总动脉;用原位杂交技术检测C-反应蛋白(CRP)mRNA和单核趋化蛋白-1(MCP-1)mRNA,免疫组化方法检测NF-κB、IL-1β、ICAM-1、VCAM-1、PDGF-A、B等蛋白的表达.结果:建立了两类脉动低切应力-AS模型;不论是否喂高脂饲料,脉动低切应力侧(左)颈总动脉均有AS斑块形成,其炎症标志因子CRP、MCP-1、NF-κB、IL-1β、ICAM-1、VCAM-1、PDGF-A、B等的mRNA和蛋白表达比假手术正常切应力对照侧(右颈总动脉)均明显增高.结论:从组织、细胞、分子多个层次和炎症反应多个环节证明了脉动低切应力致AS的炎症机制.为用生物医学工程方法和抗炎药物防治AS提供了依据.

Abstract:目的:研究蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP-1B)在2型糖尿病发病中的作用.方法:将34例患者分为对照组、BMI正常的2型糖尿病初诊组(CDM组)和肥胖或超重的2型糖尿病初诊组(ODM组),测定空腹血糖、空腹胰岛素等临床指标,并以Western印迹法测定内脏脂肪组织中PTP-1B的表达水平.结果:ODM、CDM组较对照组已存在明显的胰岛素抵抗,但前两者胰岛素抵抗程度无明显差异,PTP-1B表达水平在上述3组逐渐降低(36.53±14.82,11.57±1.89,3.39±0.94);并且校正年龄和性别后PTP-1B表达水平与BMI呈正相关(r=0.67, P＜0.01).结论:PTP-1B表达升高参与了胰岛素抵抗的发生,与2型糖尿病的发病关系密切;但PTP-1B的表达不仅与胰岛素抵抗因素相关,同时还受肥胖等因素的影响.

Abstract:目的:以供-受者配对的方式,研究IL-10启动子区-1 082、-819和-512位点单核苷酸多态性(SNP)对肾移植急性排斥的影响.方法:应用序列特异性引物聚合酶链反应(SSP-PCR)方法,测定52对首次肾移植的供-受者的IL-10启动子区-1 082、-819和-512位点的SNP,确定其单倍体型及对应的表达型.随访观察移植后1年内急性排斥的发生情况.采用Fisher精确检验,比较不同配对方式之间急性排斥发生率的差异.结果:本组供、受者中均无对应高表达型的单倍体型.随访1年者49例,18例(36.7％)患者发生急性排斥反应,发生多发急性排斥(MR)7例(14.3％).供者IL-10中表达型与急性排斥和MR间的关系有统计学趋势(P值分别为0.076和0.051),供者中表达型/受者低表达型的配对中MR发生率增加显著(P＝0.036).结论:研究IL-10 SNP与肾移植急性排斥的关系时,应该考虑供者的SNP类型.供者中表达型与急性排斥和MR相关联,供者中表达/受者低表达的配对方式与MR相关联.

Abstract:目的:探讨P物质(substance P,SP)在变应性鼻炎中对一氧化氮(nitric oxide,NO)的影响.方法:以卵清蛋白建立变应性鼻炎豚鼠模型.然后用SP滴鼻(1次/d)激发变应性鼻炎各组1、2、4、8 d,并与正常组对照,观察其症状和体征.同时观察鼻黏膜病理学变化,并采用硝酸还原酶法测定各组豚鼠的鼻腔灌洗液和血清中NO3-/NO2-的含量确定NO的浓度.结果:SP激发能诱发正常的豚鼠出现相似的变应性鼻炎症状,并能加重模型组豚鼠变应性鼻炎症状和鼻黏膜炎症(P<0.01).模型组SP激发后鼻腔灌洗液和血清中NO含量明显增加,并且随着激发次数的增加,NO有逐渐增高的趋势(P<0.05).结论:在变应性鼻炎中,SP能促进NO在鼻黏膜的产生,引发和加重变应性鼻炎的炎症反应.

Abstract:目的:探讨趋化因子受体5(CCR5)在乳腺浸润性导管癌组织的表达及意义方法:采用酶标记免疫组织化学方法检测30例乳腺浸润性导管癌及10例乳腺良性肿瘤组织中CCR5的表达情况,并应用ELISA双抗体夹心方法检测了相应患者血清中相关趋化因子MIP1α,MIP1β及RANTES的含量.结果:在乳腺浸润性导管癌组织检测到CCR5的表达(16/30,表达率53.3％),而乳腺良性肿瘤组织中无1例表达;与乳腺良性肿瘤患者相比,在乳腺浸润性导管癌患者血清中RANTES含量明显升高[(41.8±10.2) vs (16.5±2.4) ng/ml,P<0.01],而MIP1α,MIP1β无明显变化.结论:在人乳腺浸润性导管癌组织上发现CCR5的表达,其在乳腺癌的发生发展中可能起重要作用,而RANTES可能是与其相互作用的主要配体.

Abstract:目的:研究吲哚美辛对大鼠腹主动脉瘤基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的抑制作用.方法:将腹主动脉瘤弹力蛋白酶灌注模型大鼠随机分为实验组和对照组,各8只.实验组皮下注射吲哚美辛(1.6 mg/d),对照组皮下注射生理盐水.观察两组动脉瘤的形成率和动脉壁的组织学改变,并应用免疫组织化学技术检测MMP-9在动脉壁中的表达.结果:灌注1周后实验组大鼠腹主动脉瘤形成率为0,对照组大鼠动脉瘤形成率为100％,两组差异有显著意义(P<0.05).2组大鼠弹力纤维染色均可见弹力纤维不连续,结构模糊不清,但对照组大鼠动脉中层弹力纤维层数明显减少,胶原纤维溶解现象较严重,实验组弹力纤维层的损伤较轻;实验组大鼠动脉壁组织MMP-9蛋白表达为弱阳性或阴性,对照组动脉瘤组织中MMP-9蛋白表达则明显增强.结论:吲哚美辛能降低MMP-9的表达,直接影响大鼠腹主动脉中膜弹力蛋白层的降解和退变过程,抑制实验性大鼠腹主动脉瘤的形成.

Abstract:目的:观察他克莫司(FK506)对5-氟尿嘧啶(5-FU)诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡的影响,并对其机制进行初步探讨.方法:体外培养人肝癌细胞株SMMC-7721;应用流式细胞仪检测5-FU及联合FK506对细胞凋亡和细胞周期的影响;TransAM NF-κB核转录因子活性检测试剂盒检测NF-κB p65活性;细胞免疫组织化学检测NF-κB p65激活后入核情况;免疫印迹分析Cyclin D1蛋白表达差异.结果:5-FU可诱导肝癌细胞凋亡,其作用随浓度的增加而增强(P<0.05);随着5-FU用药浓度的增加,S期细胞比例和细胞增殖指数(PI)也增加; 5-FU可激活NF-κB而入核,Cyclin D1蛋白的表达逐渐增强.FK506预处理增强了5-FU诱导SMMC-7721细胞凋亡的作用,同时S期细胞比例和PI也减少; FK506预处理可抑制NF-κB入核,并可下调Cyclin D1基因的表达.结论:FK506能够协同5-FU诱导肝癌细胞株凋亡,增强肝癌细胞株对5-FU的敏感性,这种作用可能是通过抑制NF-κB活性进而下调Cyclin D1基因的表达,导致G0/G1期停滞而实现.

Abstract:目的:研究益气活血软坚解毒(YHRJ)方含药血清诱导人肝癌细胞系BEL-7402细胞内Ca2+、线粒体膜电位(△ψm)变化.方法:YHRJ方组成:生黄芪、炒白术、田三七、水红花子、藤梨根、凌霄花、炮山甲、白花舌蛇草,半枝莲.将新西兰大耳白兔12只随机分为3组,每组各4只,分别灌服生理盐水、等效剂量YHRJ方(约为人用量的5倍)与高剂量YHRJ方(约为人用量的10倍)水煎剂,用药5次后制备3种含药血清.BEL-7402细胞分为生理盐水组、生理盐水+顺铂氨铂(NS+DDP)组、YHRJ等效剂量(YHRJD)组、YHRJ等效剂量+顺铂氨铂(YHRJD+DDP)组、YHRJ高剂量(YHRJG)组、YHRJ高剂量+顺铂氨铂(YHRJG+DDP)组,分别加入生理盐水、YHRJ等效剂量、YHRJ高剂量兔血清至终浓度100 ml/L,DDP至终浓度4.5 mg/L,孵育8、12、24、48、72 h后分批处理细胞,罗丹明123、Fluo-3染色,流式细胞术(FCM)检测细胞内Ca2+、线粒体膜电位水平.结果:与NS组相比,在12、24、48 h各加中药组细胞内Ca2+浓度普遍增高(P<0.05).在12 h,各加中药组膜电位普遍增高(P<0.05),出现超极化现象;在24 h,与前基础电位相比,各加中药组线粒体膜电位明显降低(P<0.05);在48 h,各加中药组膜电位也保持在相对低的水平.结论: YHRJ含药血清有促进细胞内Ca2+内流与降低线粒体膜电位的作用.

Abstract:目的:观察体外循环(CPB)下心脏瓣膜置换手术中患者血小板与凝血功能的变化及普鲁泊福对其的影响.方法:ASAⅡ～Ⅲ级择期心脏瓣膜置换手术患者30例,随机分为对照组(n=15)和普鲁泊福组(n=15).对照组应用咪达唑仑0.05 mg/kg、芬太尼0.01 mg/kg、维库溴铵0.1～0.2 mg/kg行麻醉诱导,术中以0.5％～1.5％异氟烷及芬太尼、哌库溴铵维持麻醉;普鲁泊福组应用咪达唑仑0.05 mg/kg、芬太尼0.005～0.01 mg/kg、普鲁泊福1.5 mg/kg、维库溴铵0.1～0.2 mg/kg行麻醉诱导,术中以静注普鲁泊福4～5 mg/(kg·h)、芬太尼、哌库溴铵和0.5％～1.0％异氟烷维持麻醉.采用Sonoclot凝血与血小板功能分析仪分别测定麻醉前、诱导后5 min、CPB转流前、CPB结束后10 min、手术结束时5个时间点全血激活凝固时间(SonACT)、凝血速率、血小板功能(PF)、凝血达到高峰时间(TP),同时观察血小板(PLT)计数、血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)的变化.结果:与麻醉前相比,诱导后和转流前2组SonACT、PF、凝血速率、TP及常规凝血试验各项指标均无显著差异;CPB结束后10 min和手术结束时2组PF显著降低(P<0.01),SonACT、凝血速率、TP、PT、APTT明显延长(P<0.01),PLT计数明显减少(P<0.01);2组间各个时间点的指标相比较无显著差异.结论:CPB是影响心脏瓣膜置换手术中血小板及凝血功能的主要因素;诱导剂量1.5 mg/kg及术中持续静脉输注浓度为4～5 mg/(kg·h)的普鲁泊福对血小板功能无明显影响.

Abstract:Objective: To evaluate the efficacy of the third-generation instrumentation including TSRH, CD and ISOLA in the treatment of adult scoliosis. Methods:Thirty-five adult patients with idiopathic or degenerative scoliosis who received treatment with third-generation instrumentation (TSRH,CD and ISOLA) between July 1999 to January 2003 were retrospectively reviewed. The mean preoperative cobb angle of major curves of the frontal plane was 58.1°(42°-95°). The patients received a combined anteroposterior approach or a single posterior procedure. The mean follow-up time was 20 months(10-48 months). Preoperative and postoperative Cobb angles of the frontal plane and sagittal plane and the distance between C7 and CVLS were measured. The subjective assessment was judged by questionnaire. Results: Postoperative clinical appearance of all patients improved significantly. Mean correction of major curves of the coronal plane was 53.2％. Mean loss of correction of the coronal plane in the last follow-up was 4.3°. The distance between the midline of C7 and CVSL was corrected from 2.6 cm to 0.24 cm. The results of follow-up showed that 89.3％ patients were satisfied with the outcome. Pneumatothorax and haematothorax occurred in 2 patients. Three patients still complained of low back pain one year after operation because of adjacent degeneration in 2 patients and pseudoarthrosis in the remaining 1 patient. Conclusion: Imageologic findings and subjective assessment of the patients showed that the third-generation instrumentation can achieve good correction and trunk balance in the treatment of adult scoliosis with fewer complications.

Abstract:目的:比较苦参碱缓释片、苦参碱普通胶囊和苦参碱注射液的药代动力学及生物利用度.方法:对杂种犬进行单剂量及多剂量试验,采用反相液相色谱法测定血药浓度,对苦参碱的三种剂型进行药物动力学及生物利用度研究.结果:苦参碱普通胶囊tmax为(85±12) min,cmax为(6.360±0.215) μg/ml,缓释片的tmax为300 min,cmax为(5.088±0.490) μg/ml,注射剂的tmax为10 min,cmax为(6.500±0.404) μg/ml.缓释片相对于普通胶囊之相对生物利用度为(153.7±9.4)％,相对于注射剂的绝对生物利用度为(73.5±14.2)％.体内外相关性显著(r=0.981 2,P<0.01).结论:苦参碱缓释片释药迟缓,达峰时间长,血药浓度变化平缓,达到设计要求.

Abstract:目的:探索黄瓜霜霉病发病趋势自回归模型.方法:借鉴传染病常微分SIR模型理论,构造含二次项的黄瓜霜霉病发病趋势自回归曲线模型;用一组黄瓜霜霉病时间序列模拟自回归模型参数,再用另一组黄瓜霜霉病序列进行验证.结果:黄瓜霜霉病一阶自回归模型为I(t+1) =0.006 1I(t)(100-I(t))+ 0.996 5I(t)+0.908 4,模型的拟合优度检验为:残差平方和为133.168 7,决定系数为0.989 7,根均方误差为4.080 0.一阶自回归模型拟合优度高于二阶自回归模型.结论:模型拟合效果较理想,可以利用该模型对只有发病状况的黄瓜霜霉病时间序列进行预测.

Abstract:目的:建立基于二维液相色谱法的三维分离小胶质细胞蛋白质组的方法.方法:将小胶质细胞裂解后制备全细胞蛋白,在传统的一维HPCF、二维HPRP分离后,增加了三维SDS-PAGE电泳,对小胶质细胞实现了三维分离.结果:经过优化后的三维分离,小胶质细胞全蛋白按照pH值由高到低的顺序分为34个组分,其中pH 8.5～4.0的部分包含16个组分,每一个组分又包含若干种蛋白质.结论:同传统的二维液相色谱分离方法相比,改进后的三维分离方法对小胶质细胞全蛋白具有更彻底、更好的分离效果,为后续的质谱鉴定提供了分离度更好的样品.

Abstract:目的:探讨合并降主动脉内膜破口的A型胸主动脉夹层的手术新方法.方法:3例急性A型胸主动脉夹层患者在深低温停循环、经上腔静脉逆灌下行升主动脉和半弓置换,同时直视下探查降主动脉近端的内膜破口.用卵圆形毛毡片分别置于裂口处内膜的外侧和内侧,用4-0丙烯线作连续缝合修补破口.结果:3例患者均顺利出院.术后2～3个月行螺旋CT结果显示:3例患者胸部降主动脉夹层均已形成血栓;其中2例假腔消失,另1例假腔明显缩小,但仍有少量血流与真腔相通,可能为降主动脉内膜破口修补处渗漏.结论:对同时合并有降主动脉内膜破口的A型胸主动脉夹层患者行降主动脉内膜破裂口修补具有良好的临床效果,避免了二期降主动脉手术.

Abstract:小脑浦肯野细胞(Purkinje cells)及脑干神经元脱失和脊髓传导通路退变是大多数共济失调的主要形态学改变.近年来,国外研究主要集中在其发病机制上.遗传谱系分析和基因研究已经鉴定出不同的基因型.本文就脊髓小脑共济失调的分类、临床特征和发病机制的研究作一综述.

Abstract:UW液是目前器官移植中常用的多器官保存液,HTK液、Celsior液在肾脏、肝脏、胰腺移植中的应用也日益成熟,逐渐成为UW液可靠的替代品.最新研究发现向现有器官保存液中加入保护性因子可以减轻低温缺血损伤,改善器官保存效果.本文对近期多器官保存液实验研究和临床应用进展作一综述.

Abstract:目的:探讨以急性出血发病的脑动静脉畸形(AVM)的临床和影像学特点以及外科治疗的经验.方法:选择经颅脑CT或MRI检查确认为脑实质内出血并怀疑为AVM的21例患者,经过急性期出血的手术治疗等正确处理,DSA全脑血管造影或病理证实为脑AVM.结果:急性期对21例脑AVM患者行急诊外科手术治疗,血肿清除术17例,发现畸形血管团14例(82.35％);血肿清除加AVM显微切除术8例;血肿清除加部分畸形血管电凝术9例;单纯脑室内血肿引流术4例;去骨瓣减压术8例;部分患者待病情稳定后2周经DSA栓塞或手术治疗后治愈.结论:脑AVM出血急性期的正确外科处理,既清除血肿,又防止AVM再出血和继发性脑血管痉挛发生,达到针对病因、针对病症治疗的双重目的,为进一步血管内栓塞或手术切除奠定基础并创造良好条件.

Abstract:目的:探讨食管癌切除术不同吻合方式对术后并发症的影响.方法:1992年10月至2002年10月对206例食管癌患者,分别采用单层狭边(156例)和传统双层(50例)的方法施行胃食管吻合术,观察两种不同的吻合方式对食管癌切除术后并发症的影响.结果:单层狭边吻合组术后并发吻合口瘘、吻合口狭窄的比率(分别为5.1％、0.64％)明显低于传统双层吻合组(分别为12％、10％,P<0.05).而肺部感染、吻合口裂开、吻合口出血等并发症两组无明显差别.结论:食管癌切除术行单层狭边吻合术,各层组织对位好,血运丰富,缝线对吻合反应轻微,术后并发症的发生率低.

Abstract:目的:分析急性肺栓塞的误诊原因,寻找及时正确的诊断手段.方法:对8例诊断明确的急性肺栓塞患者(其中7例确诊前均有误诊)回顾性分析其主要临床表现、实验室检查及心电图、超声心动图、胸片、胸部CT和磁共振、肺通气灌注扫描、肺动脉造影,结合其初步诊断,分析误诊原因,并随访其预后.结果:急性肺栓塞最主要的临床表现为胸闷、气急、呼吸困难,常伴有下肢深静脉血栓形成;主要的确诊手段是肺通气灌注扫描和选择性肺动脉造影术;常被误诊为心衰、慢性阻塞性肺疾病、急性心梗、肺炎等;主要的治疗方法是溶栓和抗凝治疗,良性疾病所并发的肺栓塞治疗效果良好.结论:急性肺栓塞并非少见病,早期误诊率较高,需提高警惕.

Abstract:目的:总结脉络膜肿瘤的B型超声、CT、MRI特点,探讨其诊断价值.方法:回顾性分析35例脉络膜肿瘤病例,其中脉络膜黑色素瘤16例,脉络膜血管瘤4例,脉络膜骨瘤5例,脉络膜转移癌10例.其中20例行B型超声检查,16例经CT扫描检查,18例行MRI检查.结果:6例脉络膜黑色素瘤B超表现为明显挖空现象,同时出现脉络膜凹陷;5例脉络膜骨瘤CT表现为眼环类圆形骨密度肿瘤; 与玻璃体比较,9例脉络膜黑色素瘤MRI检查显示T1WI上呈高信号,T2WI呈低信号,其中4例增强后明显强化,3例增强后明确显示病变突破眼环向球后侵犯.B型超声、CT、MRI在脉络膜肿瘤发现方面无明显差异,但CT、MRI定位诊断优于B型超声;B型超声、MRI对脉络膜黑色素瘤的诊断优于CT;MRI对肿瘤眼外侵犯显示更为清晰;而CT对脉络膜骨瘤的诊断则明显优于B型超声、MRI.结论:B型超声、CT、MRI联合应用对大多数脉络膜肿瘤可作出定位和定性诊断,可降低漏诊、误诊率.

Abstract:目的:观察多巴胺和米力农单独和联合应用对重症冠脉旁路移植术(CABG)后低心排患者血流动力学和氧动力学的影响.方法:66例体外循环下行单纯CABG术,术后发生低心排的患者随机分为3组:A组(n=22)持续予以多巴胺(5 μg·kg-1·min-1)治疗;B组(n=22)持续予以米力农(0.5 μg·kg-1·min-1)治疗;C组(n=22)联合予以多巴胺(5 μg·kg-1·min-1)和米力农(0.5 μg·kg-1·min-1)治疗.治疗前及治疗后30、60、120、180、240 min经Swan-Ganz导管进行血流动力学测定,并同时经桡动脉置管和Swan-Ganz导管的肺动脉端抽取动脉血和混合静脉血进行血气分析,计算出全身氧供指数(DO2I)、氧耗指数(VO2I).结果:3组治疗前各血流动力学指标、DO2I、VO2I均无显著差异.治疗后心指数(CI)均较用药前显著升高(P<0.05),升高的幅度依次为C组>B组>A组,治疗后A组HR、平均动脉压(mABP)、外周血管阻力指数(SVRI)、肺血管阻力指数(PVRI)和平均肺动脉压(mPAP)无显著变化,B、C两组SVRI、PVRI和mPAP均显著降低(P<0.05),B组HR显著增快,mABP显著降低(P<0.05),但C组HR和mABP均无显著变化,治疗后VO2I、DO2I各组间无显著差异,但较治疗前相比,DO2I显著增高(P<0.05),VO2I无明显变化,VO2I/DO2I均显著降低(P<0.05).结论:重症CABG术后低心排时应用正性肌力药可促进心肌收缩功能的恢复,并可提高全身组织的氧供给,而对氧耗无明显影响,但对β受体激动剂反应性降低,联合用药优于单独用药.

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