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目的:构建膜联蛋白32(annexin32,Anx32)和低相对分子质量单链尿激酶(ScuPA32k)的融合基因,并在大肠杆菌系统内作表达.方法:利用重叠区扩增法进行基因拼接,然后在谷胱甘肽S转移酶原核表达系统内表达,Western 印迹验证表达产物.结果:重叠区扩增得到1.8 kb融合基因,该基因在原核表达系统内得到高效表达,表达量占菌体总蛋白的26%,Western 印迹证明表达产物正确.结论:用重叠区扩增法进行基因拼接快速、简便. |
关键词: 膜联蛋白32、低相对分子质量单链尿激酶、基因拼接 |
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Construction and expression of a low relative molecular mass single-chain urokinase-type plasminogen activator(ScuPA32k) and annexin32 |
颜宏利,孙树汉,陈蕊雯,杨湘越 |
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