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| 目的:观察NF-κB "decoy"ODNs在阳离子脂质体lipofectin介导下转染小鼠巨噬细胞J774.1的优化参数以及在细胞内的分布.方法:改变ODN与lipofectin比率、转染时间;用流式细胞仪检测细胞内的相对荧光强度和摄取率评价转染效率;荧光显微镜观察细胞内荧光分布;测定细胞上清乳酸脱氢酶(LDH)观察细胞损伤情况.结果:lipofectin介导转染显著提高J774.1细胞对NF-κB "decoy"ODNs的摄取;在24孔培养板中,NF-κB "decoy"ODNs与lipofectin比率(W/W)为1∶5、转染6 h时,转染效率最佳而细胞毒性相对较低;lipofectin介导转染6 h后,细胞内荧光物质主要聚集于细胞核和部分细胞质中,而直接转染时荧光物质多分布于细胞质.结论:lipofectin可增加NF-κB "decoy"ODNs的细胞摄入并改变其细胞内分布;NF-κB "decoy"ODNs与lipofectin比率(W/W)为1∶5、转染6 h时可获得最佳转染效率. |
| 关键词: NF-κB "decoy"ODNs、阳离子脂质体、转染、巨噬细胞 |
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| Optimizing condition for lipofectin-mediated NF-κB decoy oligodeoxynucleotides transfection into J774.1 cells |
| 王建,李金宝,任绪义,邓小明 |
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