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黄素单核苷酸对羟自由基损伤的大鼠肝线粒体复合物Ⅰ的保护作用
龙建纲,王学敏,高宏翔,刘志,缪明永,刘健康,LONGJian-gang,WANGXue-min,GAOHong-xiang,LIUZhi,MIAOMing-yong,LIUJian-kang
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摘要:
目的:观察黄素单核苷酸(FMN) 对羟自由基(OH·) 损伤线粒体酶复合物1(complex Ⅰ) 的作用,分析FMN与complex Ⅰ的相互作用机制.方法:差速离心法分离大鼠肝线粒体,OH·体外损伤线粒体,氧电极法测定线粒体耗氧速率,比色法检测线粒体complex Ⅰ动力学参数及线粒体内MDA、GSH 含量及SOD活性.结果:OH·损伤后,线粒体3态、4态(state3,state4) 耗氧速率、complex Ⅰ最大反应速度(Vm) 降低(P<0.05) ,但呼吸控制率(respiratory control ratio,RCR) 、磷氧比(P/O) 及complex Ⅰ米氏常数(Km) 不变,线粒体中GSH含量下降(P<0.05) ,SOD活性降低(P<0.05) ,MDA含量升高.损伤线粒体补充FMN 165 ng/ml 可部分恢复complex Ⅰ呼吸途径state3耗氧速率(P<0.05) ,补充FMN 82.5~165 ng/mg可显著提高OH·损伤的线粒体复合物Ⅰ的Vm(P<0.05) .损伤线粒体补充较低剂量的FMN(FMN<82.5 ng FMN/ml),线粒体中GSH、SOD、MDA含量不发生变化,在补充较高剂量FMN(>165 ng FMN/ml)时 ,SOD活性升高(P<0.05) ,但线粒体MDA含量升高(P<0.05) 、GSH含量下降(P<0.05) .结论:FMN能够提高氧化损伤线粒体复合物Ⅰ活性,促进complex Ⅰ呼吸途径的state3耗氧速率.FMN不能直接清除OH·及自由基,可能通过保护complex Ⅰ中的酶结合/活性位点免受OH·等自由基攻击从而维持酶活性.
关键词:  黄素单核苷酸、羟自由基、肝、线粒体酶复合物Ⅰ
DOI:
基金项目:
Protective effects of flavin mononucleotide on complexⅠ in hydroxy radical-impaired mitochondria
龙建纲,王学敏,高宏翔,刘志,缪明永,刘健康,LONG Jian-gang,WANG Xue-min,GAO Hong-xiang,LIU Zhi,MIAO Ming-yong,LIU Jian-kang
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Abstract:
Key words: