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| TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测外周血CK19 mRNA |
| 经纬,毕建威,张军,魏国,李闻捷,JINGWei,BIJian-wei,ZHANGJun,WEIGuo,LIWen-jie |
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| 目的:应用TaqMan实时荧光定量RT-PCR技术,建立定量检测CK19 mRNA的方法. 方法:采用RT-PCR从胃癌细胞中克隆CK19片段(230 bp),装入pMD 18-T Simple载体.纯化质粒,制备荧光定量PCR标准品.应用LightCycle荧光定量PCR仪检测标准品、30例正常人外周血和5例肿瘤组织CK19 mRNA. 结果:PCR扩增及测序均证实CK19 cDNA片段重组到pMD 18-T载体上,建立了稳定的检测CK19 mRNA的标准,即设定CT值在35个循环之内,检测结果低于100个拷贝数量级为阴性标本.结论:采用TaqMan实时荧光定量RT-PCR技术检测外周血CK19 mRNA是一种稳定可靠的方法. |
| 关键词: CK19、实时荧光定量PCR、TaqMan、胃肿瘤 |
| DOI： |
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| 基金项目: |
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| TaqMan real time quantitative RT-PCR in detection of peripheral blood CK19 mRNA |
| 经纬,毕建威,张军,魏国,李闻捷,JING Wei,BI Jian-wei,ZHANG Jun,WEI Guo,LI Wen-jie |
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| Abstract: |
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| Key words: |
