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| 目的:分析影响肝细胞癌微卫星-自动毛细管电泳检测结果的技术因素。方法:应用MegaBACE 500毛细管电泳测序仪对一组高度多态性微卫星PCR扩增产物进行电泳,应用Genetic Profiler软件进行基因表型分型,比较PCR扩增产物在不同处理条件下对基因分型的影响。结果:PCR反应体系残留混合物(dNTP、引物和盐离子的浓度等)对基因分型的结果有明显的影响,当PCR体系中盐离子和DNA的浓度比>10 000:1时可使等位基因片段分析系统评分出现偏差而导致结论错误,基因组DNA—PCR样品浓度在50 ng/μl时较为合适。结论:毛细管电泳测序体系中PCR反应体系残留混合物的浓度是影响基因分型结果的一个重要因素。 |
| 关键词: 微卫星 电泳 毛细管 基因分型 癌 肝细胞 |
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