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| 【立论依据】 金钗石斛(Dendrobium nobile)在治疗心血管疾病、提高机体免疫功能、抗疲劳等方面具有显著功效,在国内外具有广阔的市场前景。然而由于生长缓慢、繁殖率低等生物学特性,以及生态环境的破坏和长期过度采挖等因素,金钗石斛野生资源日渐枯竭,严重制约了市场需求。利用现代生物技术选育出优良种苗,拓展金钗石斛种质资源,为金钗石斛的产业化生产奠定基础。 【设计思路】 本研究拟采用原生质体培养结合细胞融合的方法,将含有不同优良性状的两个品系进行原生质体制备和PEG诱导细胞融合,从杂种细胞中筛选出兼具二者优良性状的异源四倍体细胞株。 【实验内容】 本研究以金钗石斛种子为外植体进行组培,诱导产生愈伤组织,进而通过酶解的方法已经获得两个品系高密度、高纯度和高活力的原生质体,进一步研究不同条件下PEG对金钗石斛细胞融合的影响,筛选出最适宜金钗石斛同核体和异核体细胞融合的条件,最后综合显微观察、核型分析和PCR检测的结果,鉴定出融合两个品系原生质体、细胞生长旺盛的细胞系。 【材料】 本研究采用两个金钗石斛研究材料:一个为指标性成分含量高、药用品质优良、源自于贵州赤水的品系,另一个为植株生长力旺盛、茎粗大、抗逆性强、农艺性状优良的云南瑞丽品系。 【可行性】 米尔斯坦和科勒用细胞融合技术制备单克隆抗体成功,1984年获诺贝尔医学与生理学奖后,该技术被广泛应用于生物、医药、农业研究领域,并成功获得白菜、甘蓝、番茄和马铃薯的融合杂种细胞。若获得四倍体金钗石斛,可以拓展它的野生资源,成为解决金钗石斛现面临问题的重要方法之一。 【创新性】 通过本研究有望培育出药用品质优良、生物量高、产业应用潜力大的异源四倍体细胞株,拓展金钗石斛的种质资源,有望进一步将该细胞株系诱导成再生苗,直接应用于生产实践,有助于贵州金钗石斛产业健康可持续的发展。 |
| 关键词: 赤水金钗石斛 PEG 原生质体 细胞融合 异源四倍体 |
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