目的 分析烧伤患者院内感染病原菌的分布及耐药性，为烧伤患者院内病原菌感染的治疗提供依据。方法 收集2015年1月至2017年12月海军军医大学（第二军医大学）长海医院534例烧伤患者的各类临床标本，分离培养病原菌。使用VITEK 2 Compact全自动微生物分析仪或Microflex基质辅助激光解析飞行时间质谱仪进行细菌鉴定，使用VITEK 2 Compact全自动微生物分析仪进行细菌药物敏感性试验。结果 共分离出1 219株病原菌。其中革兰阴性菌877株（71.9%），位列前4位的菌株分别为肺炎克雷伯菌（203株，16.7%）、铜绿假单胞菌（183株，15.0%）、鲍曼不动杆菌（176株，14.4%）和大肠埃希菌（101株，8.3%）；革兰阳性菌342株（28.1%），位列前3位的菌株分别为金黄色葡萄球菌（136株，11.2%）、屎肠球菌（72株，5.9%）和粪肠球菌（60株，4.9%）。病原菌主要来源于创面分泌物（577株，47.3%）、痰/支气管肺泡灌洗液（341株，28.0%）和尿液（147株，12.1%），93.5%（319/341）的痰/支气管肺泡灌洗液病原菌为革兰阴性菌。534例患者中有311例（58.2%）患者分离出2株及以上细菌。革兰阴性菌中肺炎克雷伯菌对常见抗菌药物的耐药率普遍偏高，呈现多重耐药趋势；铜绿假单胞菌耐药情况不容忽视，对碳青霉烯类抗菌药物的耐药率最高为35.5%；鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类药物的耐药率最高达93.2%，对其他大部分抗菌药物耐药率>80.0%。革兰阳性菌中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检出率为69.1%（94/136），肠球菌属对常见抗菌药物的耐药率为38.9%~66.3%，但尚未发现对万古霉素、替加环素和利奈唑胺耐药的革兰阳性菌。结论 烧伤患者院内感染病原菌分布较为复杂，超过一半的患者呈多重细菌感染。最常见的致病菌为肺炎克雷伯菌，呈现多重耐药趋势。革兰阳性菌对万古霉素、替加环素和利奈唑胺敏感。]]> 2019/7/26 17:38:37 1,黄晓春¹,马炜¹,李亚周¹,朱俊¹,张艳君²,万玉香^1*,秦琴^1*]]> 10true 目的 了解耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌（CRKP）的分布特点及其耐药性，为指导临床合理使用抗菌药物提供依据。方法 收集2014年1月至2017年12月临床分离的CRKP菌株，采用自动化仪器法和纸片扩散法（K-B法）对上述菌株进行药物敏感性试验，药物敏感性结果严格按照美国临床和实验室标准化协会（CLSI）和美国食品药品管理局（FDA）标准判定。采用WHONET软件和SPSS 20.0软件对数据进行统计分析。结果 共收集临床分离CRKP菌株403株，主要标本来源为痰/支气管肺泡灌洗液（169株，占41.9%）。CRKP首次分离标本来源不同，后续CRKP血流感染的发生率也不同，差异有统计学意义（P<0.05）。CRKP来源科室位列前3位的分别为烧伤重症监护病房（30.0%，121/403）、消化科（8.4%，34/403）和急诊重症监护病房（7.2%，29/403）。药物敏感性试验结果显示CRKP除对替加环素和磷霉素耐药率较低外，对其余抗生素的耐药率均>60.0%。结论 CRKP对多数常用抗生素呈现高度耐药。应加强对CRKP的耐药性监测，尤其是烧伤重症监护病房等重点科室，并采取有效措施预防和控制CRKP的传播。]]> 2019/7/26 17:38:37 9true 目的 基于γ干扰素释放试验（IGRA），利用流式荧光免疫分析法建立一种检测结核分枝杆菌（TB）感染的新方法。方法 分别用植物凝集素（PHA）、TB特异性混合多肽[早期分泌靶向抗原（ESAT-6）和培养滤液蛋白10（CFP-10）]刺激全血标本产生γ干扰素（IFN-γ），用双抗体夹心法结合流式荧光技术检测培养后血浆中的IFN-γ浓度，使用受试者工作特征（ROC）曲线评价其对TB感染的诊断效能。对该方法的线性范围、最低检测限、重复性、抗干扰性能及其与市售同类产品检测的一致性进行评价。结果 流式荧光免疫分析法检测IFN-γ的线性范围为2~1 000 pg/mL，最低检测限为0.3 pg/mL；检测100 pg/mL和500 pg/mL 2个浓度标本的重复性，2个浓度下变异系数分别为4.58%和2.46%；回收试验平均回收率为98.0%；三酰甘油≤ 50 mg/mL、胆红素≤ 0.6 mg/mL、血红蛋白≤ 10 mg/mL时对流式荧光免疫分析法检测结果无干扰。通过ROC曲线确定该方法诊断TB感染的最佳截断值为10 pg/mL，此时灵敏度为82.46%，特异度为87.30%。该方法与市售TB感染T淋巴细胞斑点试验（T-SPOT）试剂盒、QuantiFERON-TB Gold（QFT）试剂盒和万泰TB-IGRA试剂盒诊断TB感染的总符合率分别为92.5%、83.0%和85.4%，Kappa系数分别为0.822、0.622和0.630。结论 本研究建立的TB感染检测方法性能良好，准确性达到市售同类产品的水平，且在重复性、检测流程等方面具有明显优势。]]> 2019/7/26 0:00:00 8true 目的 探讨血浆（1-3）-β-D葡聚糖检测（G试验）对真菌血流感染的诊断价值。方法 收集海军军医大学（第二军医大学）长海医院2015年1月至2017年12月临床各科室送检的进行真菌血培养和G试验的血液标本。分析264例真菌血培养阳性标本的来源科室分布和菌种分布情况。1 678例同时进行真菌血培养和G试验，以真菌血培养阳性为标准，G试验结果>100.5 pg/mL为阳性，计算G试验诊断真菌血流感染的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值；采用SPSS 19.0软件进行统计学分析，以受试者工作特征（ROC）曲线评估G试验对真菌血流感染的诊断价值。结果 2015-2017年共检出血培养阳性真菌264株，主要分布在肝胆外科（81株）、心血管外科（57株）、急救科（24株）、胸外科（22株）、血液科（16株）等科室；病原菌以假丝酵母菌属为主，其中近平滑假丝酵母菌最多（142株，占53.8%），其次为角膜假丝酵母菌（36株，13.6%）、白假丝酵母菌（20株，7.6%）和热带假丝酵母菌（18株，6.8%）。1 678例同时进行真菌血培养和G试验的患者中，137例真菌血培养结果为阳性。以真菌血培养阳性为标准，G试验诊断真菌血流感染的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为61.3%、87.9%、31.1%、96.2%；ROC曲线分析结果显示，G试验对真菌血流感染的诊断效能较好（曲线下面积为0.771，95%置信区间为0.723~0.819）。137例真菌血流感染病例中，102例在血培养之前2~5 d进行了G试验，其中71例（69.6%）G试验结果为阳性。结论 血浆G试验诊断真菌血流感染的特异度较高，对真菌血流感染的早期诊断具有较好的阴性预测价值。]]> 2019/7/26 17:38:37 7true 目的 探讨铜绿假单胞菌中Ⅵ型分泌系统（T6SS）和群体感应（QS）系统在铜绿假单胞菌生物被膜形成中的作用。方法 将铜绿假单胞菌生物被膜阳性的模式菌株PAO1制备成生物被膜菌和浮游菌。采用实时荧光定量PCR法检测菌株中T6SS相关溶血素共调节蛋白（Hcp）基因Hcp1、Hcp2和Hcp3，QS系统相关基因LasR，胞外多糖相关多糖合成位点基因A（PslA）和菌膜基因A（PelA），以及Ⅳ型菌毛基因（PilA）和鞭毛蛋白基因（FliC）的表达水平。采用独立样本t检验比较PAO1生物被膜菌与浮游菌中上述基因表达的差异。结果 PAO1生物被膜菌PslA、PelA、PilA和FliC基因的相对表达量均明显高于浮游菌，分别为浮游菌的714、274、604和42倍（P均<0.05），提示制备的PAO1生物被膜菌形成了具有鞭毛和菌毛结构的成熟生物被膜。PAO1生物被膜菌Hcp1、Hcp2、Hcp3和LasR基因的相对表达量均明显高于浮游菌，分别为浮游菌的1 045、11 268、6 654和1 226倍（P均<0.05），提示T6SS和QS系统与PAO1菌生物被膜的形成有关。结论 铜绿假单胞菌中T6SS和QS系统可能参与生物被膜形成，其具体调控机制有待进一步研究。]]> 2019/7/26 17:38:37 1,李颖¹,伍勇^2*,汪怀周^1*]]> 6true 目的 探讨Sysmex XN-9000血液分析仪检测的淋巴细胞结构参数在异型淋巴细胞报警时筛查外周血异型淋巴细胞的意义。方法 选取2017年12月至2018年12月海军军医大学（第二军医大学）长海医院门诊和急诊Sysmex XN-9000血液分析仪检测时异型淋巴细胞报警的血液标本370例，记录淋巴细胞复杂程度（L-X）、淋巴细胞荧光强度（L-Y）、淋巴细胞大小（L-Z）、淋巴细胞复杂程度分布宽度（L-WX）、淋巴细胞荧光强度分布宽度（L-WY）和淋巴细胞大小分布宽度（L-WZ）6项淋巴细胞结构参数。根据显微镜下人工检测的异型淋巴细胞比例将370例血液标本分为异型淋巴细胞阳性组（异型淋巴细胞比例>5%，100例）和阴性组（异型淋巴细胞≤ 5%，270例），通过受试者工作特征（ROC）曲线评估淋巴细胞结构参数在异型淋巴细胞报警阳性时筛查异型淋巴细胞的价值，对其中准确度较高的参数进行logistic回归分析并评估这些参数联合筛查异型淋巴细胞的意义。结果 淋巴细胞结构参数中L-WY、L-X、L-Z筛查异型淋巴细胞有较高价值，ROC曲线下面积分别为0.927、0.939、0.931。利用logistic回归分析生成L-WY、L-X、L-Z筛查异型淋巴细胞的联合预测因子，联合预测因子的ROC曲线下面积为0.979。联合预测因子的截断值为0.058 1时，其筛查异型淋巴细胞的灵敏度为100.0%、特异度为77.8%。结论 在Sysmex XN-9000血液分析仪异型淋巴细胞报警时利用淋巴细胞结构参数L-WY、L-X、L-Z联合筛查异型淋巴细胞，可有效鉴别错误报警。]]> 2019/7/26 17:38:37 5true 目的 评价Sysmex XN-9000血液分析仪检测外周血有核红细胞（NRBC）的临床应用价值。方法 收集16 273份外周血标本，分别应用Sysmex XN-9000血液分析仪和显微镜下人工检测两种方法检测NRBC，以显微镜下人工检测结果为金标准计算仪器检测的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值。以两种方法检测均为阳性的248例标本作为研究对象，分析两种方法检测NRBC百分比的相关性。对277例显微镜下人工检测NRBC阳性患者的疾病谱进行分析。结果 Sysmex XN-9000血液分析仪检测NRBC的灵敏度为89.5%，特异度为99.6%，阳性预测值为80.5%，阴性预测值为99.8%。两种方法检测的NRBC百分比呈正相关（r_s=0.813，P<0.001）。分析277例显微镜下人工检测NRBC阳性患者的疾病谱，结果显示血液病患者173例，非血液病患者104例，经仪器检测的NRBC计数在两组之间差异有统计学意义（非血液病组中位数为0.38×10⁹/L，血液病组中位数为0.16×10⁹/L，P<0.05），而NRBC百分比差异无统计学意义（非血液病组中位数为2.95%，血液病组中位数为3.60%，P=0.835 1）。NRBC阳性血液病主要包括急性淋巴细胞白血病（31例）、急性粒细胞白血病（55例）、淋巴瘤（39例）、多发性骨髓瘤（18例），NRBC阳性非血液病主要包括实体肿瘤（24例）和肝硬化上消化道出血（36例）等。结论 Sysmex XN-9000血液分析仪检测NRBC准确度较高，具有较好的临床应用价值。]]> 2019/7/26 17:38:37 1△,宋珊珊^1△,高谦^1,2,陈燕¹,陈明坤^1*]]> 4true 目的 探讨同种异体肾移植患者术后移植肾功能延迟恢复（DGF）与外周血血小板参数变化的关系。方法 应用回顾性研究方法，选取2016年7月至2018年5月在海军军医大学（第二军医大学）长海医院器官移植科接受同种异体肾移植术的患者109例，根据术后是否发生DGF分为DGF组（n=41）和非DGF（non-DGF）组（n=68）。分别采集两组患者术前及术后1、3、7、14 d的外周血，检测血小板计数（PLT）、大型血小板比值（P-LCR）、平均血小板体积（MPV）、血小板分布宽度（PDW）、血小板比容（PCT），观察上述指标的动态变化并进行组间比较。采用受试者工作特征（ROC）曲线分析上述指标预测同种异体肾移植术后DGF的价值。结果 肾移植术前DGF组与non-DGF组血小板参数差异无统计学意义。肾移植术后1、3、7、14 d，DGF组PLT始终低于non-DGF组，MPV始终高于non-DGF组，且在术后7 d时差异均有统计学意义（P均<0.05）；肾移植术后DGF组与non-DGF组PCT均呈先降低后升高趋势，术后7 d时DGF组PCT低于non-DGF组且差异有统计学意义（P<0.05）；肾移植术后DGF组与non-DGF组PDW和P-LCR均呈先升高后降低趋势，术后7 d时DGF组PDW大于non-DGF组且差异有统计学意义（P<0.05），而P-LCR在DGF组和non-DGF组之间差异无统计学意义（P=0.184）。肾移植术后7 d PDW和PCT预测DGF的ROC曲线下面积分别为0.781和0.758，最佳截断值分别为16.75 fL和0.155%，特异度分别为92.6%和63.2%，灵敏度分别为61.0%和75.6%。结论 对接受同种异体肾移植术的患者进行血小板参数的动态监测有助于DGF的早期诊断，移植术后7 d PDW>16.75 fL、PCT<0.155%时患者发生DGF的风险增加。]]> 2019/7/26 17:38:37 3true 目的 评估中性粒细胞与淋巴细胞比值（NLR）、血小板与淋巴细胞比值（PLR）在强直性脊柱炎（AS）诊断中的价值。方法 纳入海军军医大学（第二军医大学）长海医院收治的AS患者80例（AS组）及健康体检者100例（健康对照组）作为研究对象。采集研究对象清晨空腹静脉血进行血常规检查并计算NLR和PLR，比较两组NLR和PLR的差异，采用受试者工作特征（ROC）曲线评价NLR、PLR诊断AS的灵敏度和特异度并进行联合诊断试验。结果 与健康对照组相比，AS组NLR、PLR均增高，差异均有统计学意义[2.25（1.66，3.35）vs 1.50（1.23，2.09），P<0.01；147.94（104.11，188.80）vs 105.75（89.55，148.02），P<0.01]。ROC曲线分析显示，NLR诊断AS的曲线下面积（AUC）为0.694[95%置信区间（CI）：0.615~0.772，P<0.01]，以最佳截断值（1.64）为诊断标准时其灵敏度和特异度分别为77.5%和58.0%；PLR诊断AS的AUC为0.662（95%CI：0.580~0.756），以最佳截断值（120.91）为诊断标准时其灵敏度和特异度分别为66.2%和63.0%。联合诊断试验结果显示，NLR与PLR并联试验（NLR/PLR）诊断AS的灵敏度和特异度分别为83.8%和50.0%，NLR与PLR串联试验（NLR+PLR）诊断AS的灵敏度和特异度分别为61.2%和75.0%。结论 NLR和PLR对AS具有一定的诊断价值，二者联合诊断可提高诊断的灵敏度和特异度。]]> 2019/7/26 0:00:00 1△,刘云龙^2△,郑杰¹,宋珊珊¹,裴开玮¹,陈燕^1*]]> 2true 目的 分析定标和测定时不同环境温度下Luminex流式荧光免疫分析法测定糖类抗原242（CA242）结果的差异，评价环境温度对测定结果的影响。方法 选择高值和中值2个不同浓度的标本，分别采用Luminex流式荧光免疫分析法在11个温度点（18.3、20.1、21.5、22.2、24.1、25.0、25.4、26.5、27.4、28.5、30.0℃）重复测定CA242 5次，以定标时环境温度（25℃）下的检测结果的平均值为参比值，计算不同环境温度下检测结果的偏倚。随机选择49例涵盖高、中、低值的标本，分别采用Luminex流式荧光免疫分析法在20、25和30℃下对CA242进行测定，比较测定结果并分析其相关性。结果 中值标本和高值标本在18.3℃下测定结果的偏倚分别为-35.6%和-29.4%。49例标本在20℃下的测定结果与25℃下的测定结果差异有统计学意义（P<0.001），并且二者具有相关性（回归方程：Y=0.676 9X+0.374 7，R²=0.990 5）；在30℃下的测定结果与25℃下的测定结果差异有统计学意义（P<0.001），并且二者具有相关性（回归方程：Y=0.896 6X+0.227 0，R²=0.999 4）。结论 环境温度过低或过高会对Luminex流式荧光免疫分析法测定CA242产生负性影响，测定时应使环境温度保持相对恒定且控制在定标温度±4℃范围内。]]> 2019/7/26 17:38:28 1true