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细胞外基质蛋白1对MCF-7和HUVEC增殖影响的研究
侯彦强,蔡丽君,范列英,罗鹏,何玮,娄加陶,周演武,倪健,孔宪涛,仲人前
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(第二军医大学长征医院实验诊断科,上海,200003;上海富纯中南生物技术有限公司,上海,201702)
摘要:
目的:探讨细胞外基质蛋白1(extracellular matrix protein 1,ECM1)对乳腺癌细胞株MCF-7和人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)增殖的影响.方法:构建ECM1-pEGFP-N2真核表达载体,采用PCR方法,扩增出ECM1基因,用BglⅡ和Kpn Ⅰ双酶切ECM1基因和pEGFP-N2载体,连接酶切目的片段,转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆酶切、测序鉴定;利用脂质体介导的转染技术转染MCF-7细胞,药物G418筛选稳定转染细胞株,荧光显微镜检测报告基因表达产物EGFP,免疫组化检测ECM1蛋白表达.用MTT比色法分析ECM1对MCF-7和HUVEC增殖的影响.结果:成功构建了ECM1-pEGFP-N2真核表达载体,并在MCF-7中稳定表达;MTT比色法检测MCF-7增殖结果显示未转染组、空载体转染组和ECM1转染组的D570值分别为0.95±0.07、0.97±0.09和1.03±0.12,三者无明显差异;MTT比色法检测HUVEC增殖结果示培养液组、空载体转染上清组、ECM1转染上清组HUVEC D570值分别为0.89±0.06、0.92±0.09和1.39±0.10,差异具有显著性意义(P<0.01).结论:ECM1对乳腺癌细胞株MCF-7的增殖无影响,但能显著促进血管内皮细胞体外增殖.
关键词:  细胞外基质蛋白1、MCF-7、人脐静脉内皮细胞、细胞增殖
DOI:10.3724/SP.J.1008.2004.01310
投稿时间:2004-07-23修订日期:2004-11-23
基金项目:国家自然科学基金(30080027)、上海市重点基础研究项目(02JC14005)、上海市优秀学科带头人项目(沪卫科9713)
Effect of human extracellular matrix protein 1 on proliferation of MCF-7 and human umbilical vein endothelial cells
侯彦强,蔡丽君,范列英,罗鹏,何玮,娄加陶,周演武,倪健,孔宪涛,仲人前
(第二军医大学长征医院实验诊断科,上海,200003;上海富纯中南生物技术有限公司,上海,201702)
Abstract:
Key words: