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HLA-A*0201/BSP融合基因的构建与表达 |
娄加陶,范列英,张玉芳,侯彦强,周演武,耿红莲,仲人前 |
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(第二军医大学长征医院实验诊断科,上海,200003;杭州市第一人民医院中心实验室,杭州,310006) |
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目的:克隆表达HLA-A*0201 α链胞外区与BirA酶底物肽(Bir A substrate peptide,BSP)的融合蛋白.方法:采用PCR技术从人HLA-A*0201 α链cDNA库中克隆基因的胞外区,拼接可生物素化的BSP片段序列后,经双酶切插入载体pET28a(+)后在E.coli BL21(DE3)诱导高效表达,并对表达产物进行纯化与复性.结果:成功地扩增出HLA-A*0201/BSP基因并测序证实,构建了融合表达载体pET-HLA-A*0201,并获表达与纯化.结论:成功构建了HLA-A*0201/BSP融合基因,为进一步体外构建特定的HLA-A*0201四聚体,标记相应特异性CD8+T细胞提供物质基础. |
关键词: HLA-A*0201α链胞外区、BirA酶底物肽、融合基因、基因表达 |
DOI:10.3724/SP.J.1008.2004.01332 |
投稿时间:2004-07-23修订日期:2004-10-15 |
基金项目:上海市重点基础研究项目(02JC14005) |
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Construction and expression of HLA-A * 0201/BSP fusion gene |
娄加陶,范列英,张玉芳,侯彦强,周演武,耿红莲,仲人前 |
(第二军医大学长征医院实验诊断科,上海,200003;杭州市第一人民医院中心实验室,杭州,310006) |
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Key words: |