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| 目的:制备人纤维连接蛋白(fibronectin,FN)羧基端细胞结合域的单克隆抗体,并以该抗体检测心脏瓣膜基质蛋白中FN蛋白的表达情况.方法:用RT-PCR方法获取人FN羧基端细胞结合域基因序列,通过pET32质粒表达获得TRX融合蛋白.并以纯化的融合蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠后,按常规方法制备成单克隆抗体,获得分泌抗FN单克隆抗体的杂交瘤细胞株.结果:蛋白电泳结果显示,所获TRX融合蛋白条带与理论计算值相符,免疫动物后获得2株分泌抗FN羧基端细胞结合域不同位点单克隆抗体的杂交瘤细胞株,抗体亚型为IgG2a,免疫组化显示该抗体能特异性地结合人心脏瓣膜基质中的FN.结论:成功制备了分泌抗FN单克隆抗体,为FN结构、功能和机制的研究提供了有效工具. |
| 关键词: 纤维连接蛋白、细胞结合域、抗体,单克隆 |
| DOI：10.3724/SP.J.1008.2004.01357 |
| 投稿时间：2004-07-30修订日期：2004-11-18 |
| 基金项目:国家自然科学基金(30371418) |
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| Preparation and dentification of monoclonal antibodies against carboxy-terminal cell-binding domain of human fibronectin |
| 黄盛东,陆方林,陈和忠,龚德军,徐志云 |
| (第二军医大学长海医院胸心外科,上海,200433) |
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