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目的:探讨核酶对人金属蛋白酶组织抑制因子1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)基因表达的特异性抑制作用,以寻找治疗增生性瘢痕的新方法.方法:应用特异切割TIMP-1的嵌合型核酶基因克隆pU6-Rz182转染增生性瘢痕成纤维细胞(hypertrophic scar derived fibroblasts,HSF),G418筛选稳定表达核酶的细胞克隆,MTT法检测并绘制细胞生长曲线,观察核酶对细胞生长的影响;RT-PCR检测核酶对靶基因TIMP-1表达的抑制.结果:在mRNA水平,与正常对照组相比,稳定表达活性核酶Rz182的HSF中TIMP-1的表达被抑制了87.9%,而点突变核酶抑制达36.4%,两者之间差异非常显著(P<0.01).HSF细胞生长进入平台期后,转染核酶基因组与点突变组及对照组相比,活细胞数显著降低(P<0.01),而点突变组与对照组无明显差异.结论:核酶U6Rz182能特异地抑制HSF中TIMP-1的表达,并使HSF的增殖受到抑制. |
关键词: 核酶、瘢痕、组织金属蛋白酶抑制因子、克隆 |
DOI:10.3724/SP.J.1008.2005.00030 |
投稿时间:2004-07-15修订日期:2004-10-21 |
基金项目:国家自然科学基金(30371472,39970761)、中国科学院资助项目(KSCX2-2-04) |
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Effect of ribozyme on TIMP-1 expression and proliferation fibroblasts in human skin scars |
吴建明,汪滋民,吴包金,林子豪,江华,袁湘斌,金由辛,高中玉 |
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