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人瘢痕疙瘩成纤维细胞Smad2特异siRNA的制备和活性鉴定 |
高中玉,林子豪,汪滋民,江华,袁湘斌,赵耀忠,吴宏,史毅,金由辛 |
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目的:探讨应用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)特异性抑制人瘢痕疙瘩成纤维细胞内Smad2基因表达,筛选高效特异性siRNA.方法:根据siRNA设计原则,针对人Smad2基因序列特征设计Smad2 特异siRNA(1-3),转染瘢痕疙瘩成纤维细胞,RT-PCR检测siRNA对Smad2基因的抑制效果.结果:Smad2 siRNA-3可有效抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞中Smad2基因的表达.随siRNA-3终浓度由50 nmol/L增加到100 nmol/L 及200 nmol/L,抑制效率逐渐增强(P<0.05);siRNA-3以终浓度200 nmol/L转染后24 h抑制效果最强,48 h逐渐减弱,但仍明显抑制(P<0.05).结论:应用RNA干扰技术可抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞中Smad2 基因的表达,其抑制作用具有明显的时间、浓度依赖性. |
关键词: RNA干扰、Smad2、瘢痕疙瘩、成纤维细胞 |
DOI:10.3724/SP.J.1008.2005.00034 |
投稿时间:2004-07-15修订日期:2004-09-09 |
基金项目:国家自然科学基金(30300369,004119065) |
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Preparation and characterization of Smad2 specific siRNA in human keloid fibroblast |
高中玉,林子豪,汪滋民,江华,袁湘斌,赵耀忠,吴宏,史毅,金由辛 |
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