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表达红色荧光蛋白DsRed报告基因的逆转录病毒载体的构建和在肝干细胞体内示踪中的应用
李文林,苏娟,陶欣荣,JosephTLau,胡以平
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(第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室,上海 200433;The Department of Molecular and Cellular Biology,Roswell Park Cancer Institute,Elm and Carlton Streets,Buffalo,NY 14263,USA)
摘要:
目的:建立表达红色荧光蛋白DsRed的逆转录病毒载体,并对肝原始细胞进行体外标记和体内示踪研究.方法:将pDsRedl 1载体中的DsRed片段克隆到逆转录病毒载体pLNCG C1中构建了pLNCG DsRed载体.将该载体导入Phoenix包装细胞,进而采用乒乓转染的方法感染包装细胞PT67,获得高滴度稳定产毒的PT67细胞系.结果:利用PT67细胞系产生的病毒上清可以高效的感染体外培养的肝原始细胞系.将这些DsRed标记的肝原始细胞移植到小鼠损伤肝脏中,4周后可以在再生肝脏中清晰地观察到具有红色荧光的外源细胞.结论:由于肝脏组织没有红色自发荧光,用DsRed标记肝原始细胞进行肝内示踪时背景干扰小.
关键词:  红色荧光蛋白、基因,报告、逆转录病毒载体、肝干细胞
DOI:
基金项目:
Construction of retroviral vector expressing DsRed and its utilization in tracing transplanted liver progenitor cells in vivo
李文林,苏娟,陶欣荣,Joseph T Lau,胡以平
(第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室,上海 200433;The Department of Molecular and Cellular Biology,Roswell Park Cancer Institute,Elm and Carlton Streets,Buffalo,NY 14263,USA)
Abstract:
Key words: