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目的:应用Cre/loxP系统建立诱导型糖皮质激素受体(GR)基因剔除小鼠模型,为在体内直接进行GR基因的研究提供条件.方法:针对GR基因第2外显子构建诱导型目标载体,将打靶载体电穿孔转染胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES),经Southern杂交筛选发生正确同源重组的ES细胞,囊胚注射法制备嵌合体并进行生殖系检测及纯化建系.结果:成功构建了针对GR基因第2外显子的诱导型目标载体,转染ES细胞获得了工程化的ES细胞,经囊胚注射获得了由工程化的ES细胞和体细胞共同发育而来的嵌合体小鼠.结论:基于Cre/loxP系统的GR基因条件性打靶嵌合鼠的获得,为得到理想的诱导型GR基因剔除小鼠模型奠定了基础. |
关键词: 受体、糖皮质激素、嵌和体、Cre/loxP系统、胚胎干细胞 |
DOI: |
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基金项目: |
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Generation of chimeras of glucocorticoid receptor conditional gene targeting mice based on Cre/loxP system |
何志颖,姚玉成,李建秀,王新民,胡以平 |
(第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室,上海,200433) |
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