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目的:探讨应用RT-PCR技术检测CK19 mRNA的优化方法.方法:采用RT PCR方法分别检测经病理确诊的胃癌组织及有明确肿瘤病灶的胃癌患者和健康对照者外周血中CK19 mRNA的表达.结果:通过设计多对引物进行对比及设立未经逆转录的RNA为模板的对照可观察到CK19假基因及基因组DNA的干扰现象.在合理设计错配引物的基础上选择合适的退火温度可消除干扰.结论:在运用RT-PCR法检测外周血中CK19 mRNA表达时常存在基因组及假基因等因素的干扰,通过本方法可有效地克服这种干扰作用. |
关键词: 胃肿瘤、细胞角蛋白19、微转移、RT-PCR |
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Problems in detecting CK19 mRNA with RT-PCR and corresponding countermeasures |
毕建威,经纬,张军,李闻捷 |
(第二军医大学长海医院普通外科,上海,200433) |
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