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| 携带野生型PTEN基因的重组腺病毒治疗子宫内膜癌的体外研究 |
| 刘玉环,杨培丽,蔡在龙,崔英,俞超琴,王锡智,惠宁,古航,沙金燕 |
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| (第二军医大学长海医院妇产科,上海200433;基础医学部生物化学与分子生物学教研室,上海,200433;长海医院中医科;长海医院泌尿外科) |
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| 摘要: |
| 目的:观察携带野生型PTEN基因的重组腺病毒(Ad-PTEN)体外转染子宫内膜癌细胞后的表达,并探讨其对肿瘤细胞产生抑制增殖、诱导凋亡的作用及机制.方法:细菌内同源重组方法构建Ad-PTEN,体外转染PTEN基因突变的子宫内膜腺癌RL95-2细胞中,X-gal染色检测转染效率.应用RT-PCR、Western印迹、细胞免疫组化检测Ad-PTEN在RL95-2细胞中的转录及表达; 应用细胞计数、MTT实验, 观察Ad-PTEN对RL95-2细胞生长的影响;应用光镜、透射电镜观察外源性PTEN基因表达对RL95-2细胞形态学及超微结构的影响;应用流式细胞分析仪(FCM)检测Ad-PTEN对RL95-2细胞周期分布的影响、凋亡诱导作用及半胱氨酸天冬氨酸特异蛋白酶casapase-3的激活.结果:外源性野生型PTEN基因经腺病毒介导成功转入RL95-2细胞,3种方法均检测出有PTEN mRNA及PTEN蛋白的表达,当感染复数(MOI)为50时,体外转染效率达到100％.Ad-PTEN显著抑制RL95-2细胞生长并诱导其凋亡.此外, Ad-PTEN还能诱导RL95-2细胞周期G0/G1期阻滞以及caspase-3的激活.结论:重组腺病毒Ad-PTEN是高效的基因转移系统,能将PTEN目的基因转移到丧失该基因功能的子宫内膜癌RL95-2细胞中,对RL95-2细胞产生强有力的生长抑制及凋亡诱导作用,其机制可能包括细胞周期G0/G1阻滞及caspase-3 蛋白酶的激活. |
| 关键词: 子宫内膜癌、基因治疗、PTEN基因、腺病毒、细胞周期、细胞凋亡、体外研究 |
| DOI： |
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| 基金项目: |
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| Inhibitory effects of recombinant adnovirus carrying wild type PTEN gene on endometrial carcinoma cells: an in vitro study |
| 刘玉环,杨培丽,蔡在龙,崔英,俞超琴,王锡智,惠宁,古航,沙金燕 |
| (第二军医大学长海医院妇产科,上海200433) |
| Abstract: |
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| Key words: |
