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目的:观察低氧培养条件下小鼠胎肝基质细胞中转化生长因子-β1 (transforming growth factor-β1,TGF-β1)的表达情况,为其用于脑缺血治疗提供依据.方法:取孕14.5 d小鼠胚胎肝细胞进行贴壁培养及传代.生长至次融合状态的第5代细胞在95% N2和5% CO2混合气条件下培养,在合适时间下应用半定量RT-PCR和Western印迹技术检测其TGF-β基因表达.结果:在常氧压下培养的胎肝基质细胞中,TGF-β1 mRNA及其蛋白水平均较低;而低氧培养则可显著提高胎肝基质细胞TGF-β1基因的mRNA及其蛋白水平.TGF-β1 mRNA在低氧培养4 h时即显著增高,PCR产物TGF-β1与β-actin信号比从常氧培养的(5.47±2.76)%增加到(10.38±3.65)%,P<0.01;16 h时达到高峰水平,信号比增加到(23.84±7.55)% ,P<0.01,升高到4.36倍.TGF-β1蛋白在低氧培养4 h时即显著增高,Western检测TGF-β1与β-actin信号比从常氧培养的(2.97±1.75)%增加到(8.03±3.94)%,P<0.01;16 h时达到高峰水平,信号比增加到(20.71±8.11)% ,P<0.01.结论:低氧可诱导TGF-β1在小鼠胎肝基质细胞中的表达,提示小鼠胎肝基质细胞在脑缺血中的潜在治疗作用. |
关键词: 低氧、转化生长因子β1、胚胎、肝、基质细胞 |
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Increased expression of transforming growth factor-beta 1 in fetal liver stromal cells induced by hypoxia |
刘革修,张洹,何冬梅,谭广销,LIU Ge-xiu,ZHANG Yuan,HE Dong-mei,TAN Guang-xiao |
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