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修饰后日本血吸虫Sjc-97基因的真核表达及其免疫原性 |
钱磊;张冬梅;庄英萍;邢金花;周爱国;潘卫庆 |
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(第二军医大学基础医学部病原生物学教研室,第二军医大学基础医学部病原生物学教研室,华东理工大学生物工程学院,第二军医大学基础医学部病原生物学教研室,第二军医大学基础医学部病原生物学教研室,第二军医大学基础医学部病原生物学教研室 上海200433华东理工大学生物工程学院,上海200237 ,上海200433 ,上海200237 ,上海200433华东理工大学生物工程学院,上海200237 ,上海200433 ,上海200433) |
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摘要: |
目的 :研究日本血吸虫大陆株副肌球蛋白基因第 3区域片段 (Sjc- 97f3)毕氏酵母表达产物的免疫原性。方法 :根据毕氏酵母密码子使用频率重新设计 Sjc- 97核苷酸序列 ,依据不对称 PCR原理人工合成 Sjc- 97f3,并在毕氏酵母中表达。表达产物通过 Ni- NTA亲和层析和凝胶过滤层析方法纯化 ,再分别与 ISA72 0和 Al(OH) 3佐剂乳化后 ,免疫 C5 7BL/ 6和昆明小鼠 ,通过尾蚴膜反应和 EL ISA反应检测特异性抗体。 结果 :Sjc- 97f3基因在毕氏酵母中获得了高水平分泌表达 ,其表达产物能与日本血吸虫免疫血清进行特异性免疫反应。经与佐剂乳化后 ,该蛋白具有良好的免疫原性。EL ISA结果显示重组蛋白在小鼠体内可激发明显的抗体反应 ,但 2种佐剂所诱导的抗体水平以 ISA72 0佐剂为高 ;该抗原在不同品系小鼠中的抗体水平存在显著差异 (P |
关键词: 日本血吸虫 副肌球蛋白 毕氏酵母 基因表达 免疫原性 |
DOI: |
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Key words: |