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幽门螺杆菌UreB核酸疫苗的构建 |
徐灿;李兆申;屠振兴;杜奕奇;孙波;杨骅;龚燕芳;满晓华;许爱芳 |
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(第二军医大学长海医院消化内科,第二军医大学长海医院消化内科,第二军医大学长海医院消化内科,第二军医大学长海医院消化内科,第二军医大学长海医院消化内科,第二军医大学长海医院消化内科,第二军医大学长海医院消化内科,第二军医大学长海医院消化内科,第二军医大学长海医院消化内科 上海200433 ,上海200433 ,上海200433 ,上海200433 ,上海200433 ,上海200433 ,上海200433 ,上海200433 ,上海200433) |
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摘要: |
目的 :构建含幽门螺杆菌 (H elicobacter pylori,Hp)尿素酶 B亚单位 (Ure B)基因的核酸疫苗。方法 :抽提 Hp标准菌株 CCUG1 7874基因组 DNA,应用 PCR技术从基因组 DNA扩增 U re B基因 ,克隆入 PUCm T载体 ,检测 U re B基因序列。经过一系列酶切、连接反应将其克隆入真核表达载体 p IRES,转入感受态大肠杆菌 DH5 α,筛选阳性克隆 ,通过 PCR和酶切反应进行鉴定。通过脂质体法将构建好的重组载体 p IRES- Ure B转染 COS- 7细胞 ,Western印迹分析检测 p IRES- U re B表达 Ure B蛋白的免疫原性。 结果 :扩增出长约 1 70 0 bp的 U re B基因 ,与基因库 Hp U re B序列一致 ,PCR和酶切鉴定结果证实成功构建了含 U re B基因的 Hp核酸疫苗 p IRES- U re B,并且 Western印迹分析检测到特异性的蛋白条带。结论 :构建了具有免疫反应性 Ure B基因的 Hp核酸疫苗 ,为进一步探索其免疫作用奠定了基础 |
关键词: 幽门螺杆菌 尿素酶B亚单位 疫苗 DNA |
DOI: |
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