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牛初乳免疫球蛋白 A的纯化与原子力显微镜观测
傅骁勇;谭璐;徐敬;朱国栋;李杰;王红阳
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(第二军医大学东方肝胆外科医院国际合作生物信号转导研究中心,第二军医大学东方肝胆外科医院国际合作生物信号转导研究中心,同济大学物理系波尔固体物理研究所 ,同济大学物理系波尔固体物理研究所 ,同济大学物理系波尔固体物理研究所 ,第二军医大学东方肝胆外科医院国际合作生物信号转导研究中心 上海200438 ,上海200438 ,上海200438)
摘要:
目的 :纯化牛初乳免疫球蛋白 A(Ig A)并在原子力显微镜 (AFM)下进行观测。 方法 :应用逐级盐析、透析和离子交换层析等生化手段 ,从牛初乳中提取 Ig A,SDS- PAGE鉴定纯化结果。应用 AFM对吸附在新剥离云母或多聚赖氨酸 (PL L)处理云母片基上的 Ig A进行空气相的结构观测。 结果 :考马斯亮蓝染色鉴定纯化的蛋白含有重链、轻链和分泌片 ;正常生理条件下的 Ig A以寡聚体结构为主 ,单体大约 2 .6 nm× 1 8.0 nm× 2 0 .2 nm,与电镜结果基本吻合 ;Ig A在 PL L 处理云母片基上的吸附呈现树枝状聚集 ,随孵育时间的延长 ,聚集现象更趋明显。 结论 :结合生化方法和 AFM观测 ,可对 Ig A等免疫球蛋白分子进行天然结构状态的微观探测 ,为研究其生理调控功能的结构基础提供有效的研究途径
关键词:  免疫球蛋白A  原子力显微镜  牛初乳  纯化
DOI:
基金项目:
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Key words: