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| 新生隐球菌CAP64荚膜缺陷株ura5突变株的筛选和鉴定 |
| 郭秀军;廖万清;任大明;王荫榆;霍克克 |
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| (第二军医大学长征医院皮肤科,第二军医大学长征医院皮肤科,复旦大学遗传研究所微生物组,复旦大学遗传研究所微生物组,复旦大学遗传研究所微生物组 上海200003 ,上海200003 ,上海200433 ,上海200433 ,上海200433) |
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| 摘要: |
| 目的 :筛选和鉴定新生隐球菌 CAP6 4荚膜缺陷株 ura5突变株。方法 :(1 )用体外基因重组技术将 G4 1 8抗性基因插入到新生隐球菌 1 .2 kb的 ura5基因中 ;(2 )用电转化方法将体外重组片段导入受体菌 ;(3)利用 5 -氟乳清酸 (5 - FOA)反筛选法筛选 ura5突变株 ;(4 )用遗传学鉴定营养缺陷株的方法鉴定突变体。结果 :1株突变株 ura5基因的序列与重组片段相同 ;其Southern杂交显示在 2 0 kb和 7kb处出现 2条杂交条带 ;该突变株能在 SDU、SDU和 YEPD/ G4 1 8平板上生长 ,不能在 SD平板生长 ;其生长曲线显示突变株生长速度依赖于尿嘧啶的提供量。 结论 :获得了 1株新生隐球菌 CAP6 4荚膜缺陷株 ura5突变株 ,建立了新生隐球菌 CAP6 4荚膜缺陷株转化系统 ,为 CAP6 4基因的功能研究提供了工具 |
| 关键词: 新生隐球菌 荚膜缺陷 突变株 转化 ura5基因 |
| DOI： |
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