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一种改进的提取人外周血和组织线粒体DNA的方法 |
朱克军;汪振诚;王学敏;缪明永;焦炳华 |
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(第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室,第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室,第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室,第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室,第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室 上海200433 ,上海200433 ,上海200433 ,上海200433 ,上海200433) |
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摘要: |
目的 :建立一种简便、快捷地从人外周血和组织中制备高质量线粒体 DNA的方法。 方法 :以差速离心法分离线粒体 ,用碱性 SDS法裂解线粒体膜 ,释放线粒体 DNA后用酚 /氯仿抽提 ,TE或 dd H2 O溶解。然后将所得线粒体 DNA进行纯度鉴定并和其他现有方法制备的线粒体 DNA用 PCR进行长片段扩增 ,比较扩增效果。结果 :用改进的方法制备的线粒体 DNA中没有检测到核 DNA,并能有效扩增 8kb长的目的片段。 结论 :改进后的方法简便、快捷 ,制备的线粒体 DNA纯度高 ,也有利于长片段 PCR扩增 |
关键词: 聚合酶链反应 线粒体DNA 分离 外周血 骨骼肌 |
DOI: |
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基金项目: |
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Abstract: |
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Key words: |