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| PTEN cDNA重组腺病毒载体的构建 |
| 杨培丽;刘玉环;蔡在龙;娄永华;崔英;杨志峰;毛积芳 |
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| (长海医院妇产科 ,长海医院妇产科 ,第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室,第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室,长海医院妇产科 ,第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室,第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室 上海 200433 ,上海 200433 ,上海 200433 ,上海 200433) |
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| 摘要: |
| 目的:应用同源重组法构建含野生型抑癌基因PTEN cDNA的腺病毒载体pAdPTEN cDNA,产生重组腺病毒AdPTEN。方法:将PTEN cDNA自载体pcDNA3-PTEN cDNA中切出,亚克隆至穿梭质粒pShuttle-CMV中,然后与腺病毒质粒pAdeasy-1在大肠杆菌BJ5183中同源重组,产生重组PTEN cDNA的腺病毒载体pAdPTEN cDNA,通过脂质体介导将pAdPTEN cDNA转染至HEK293细胞,产生有感染能力的腺病毒AdPTEN,并测定其滴度。结果:产生具有感染能力的重组腺病毒AdPTEN,滴度约为5×109pfu／ml。结论:成功构建出含有PTEN cDNA的具有感染能力的腺病毒,并可获得较高的病毒滴度,为进一步研究PTEN基因的功能和相关肿瘤的基因治疗提供有效的基因转移载体。 |
| 关键词: PTEN 重组腺病毒 载体 |
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