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抑制miR-21表达对乳腺癌细胞株MDA-MB-231生存和凋亡的影响
邱芳1*,李晶2
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(1. 中国医科大学附属盛京医院乳腺外科,沈阳 110004;2. 中国医科大学附属盛京医院超声科,沈阳 110004)
摘要:
目的:探讨下调miR-21表达对抑制乳腺癌细胞株MDA-MB-231增殖能力的效果和机制。方法:通过脂质体介导转染反义寡聚核苷酸(ASO-miR-21)下调乳腺癌细胞株MDA-MB-231中miR-21的表达。使用荧光定量PCR检测转染后MDA-MB-231细胞miR-21表达水平下调;CCK-8法评价ASO-miR-21对 MDA-MB-231细胞生长效果的抑制;Hoechst33258染色检测转染后MDA-MB-231细胞细胞凋亡情况;采用RT-PCR及western blot评价转染后MDA-MB-231细胞中的肿瘤发育相关基因(Bcl-2、TPM1,和Caspase3)表达的改变。结果:实时定量PCR法:ASO-miR-21转染组miR-21表达较对照组下调;CCK-8结果显示ASO-miR-21转染组肿瘤细胞生长速度小于对照组与无义寡核苷酸组; Hoechst33258染色检测细胞凋亡可见ASO-miR-21转染组细胞凋亡程度高于对照组与无义寡核苷酸组;RT-PCR及western blot表明ASO-miR-21治疗后MDA-MB-231细胞Bcl-2下调、TPM1,Caspase3表达不同程度上调。结论:以miR-21作为靶点抑制MDA-MB-231生长具有可行性,miR-21可以作为乳腺癌基因治疗的候选靶点。
关键词:  miR-21  反义寡核苷酸类  乳腺肿瘤  细胞存活  细胞凋亡
DOI:10.3724/SP.J.1008.2011.0691
投稿时间:2011-03-21修订日期:2011-06-11
基金项目:
Effect of miR-21 inhibition on survival and apoptosis of breast cancer cell line MDA-MB-231
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Abstract:
Key words:  miR-21  反义寡聚核苷酸  乳腺癌细胞株MDA-MB-231  基因治疗  Inhibition