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【目的】 骨髓间充质干细胞 (bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC)的高度自我更新和多向分化潜能等特性为解决胰岛移植供体来源提供了可能性。我们观察了乳鼠BMSC在不同浓度血清条件培养基中的诱导分化影响,检测了胰岛相关因子胰岛素(Insulin)、胰十二指肠同源性盒因子-l (pancreatic and duodenal homeobox factor-1,PDX-l)和巢素蛋白(Nestin)等基因的表达变化。 【方法】 从乳鼠股骨冲洗骨髓建立BMSC分离、培养方法,通过MTT方法检测BMSC增殖趋势,通过RT-PCR检测Insulin、PDX-1和Nestin mRNA表达变化,并用免疫荧光检测Insulin、PDX-1和Nestin蛋白在细胞内表达情况。 【结果】 高浓度血清条件培养基能诱导BMSC增殖与分化。与对照组相比较,诱导后BMSC表达的Insulin、和PDX-1 mRNA随血清浓度升高变化而显著性上调(P<0.05);Nestin mRNA随血清浓度升高变化而显著性下调(P<0.05)。免疫荧光检测显示,与1周刺激诱导时间相比较,BMSC表达Insulin和PDX-1蛋白在2周时表达显著性增强;Nestin蛋白在2周时显著性下降。 【结论】 高浓度血清条件培养基能促进大鼠BMSC表达胰岛相关基因Insulin、PDX-1和Nestin,并随着刺激诱导时间延长而发生不同的调节变化,提示BMSC能在不同微环境条件刺激下向胰岛样细胞(胰岛β样细胞)分化,为糖尿病治疗采用干细胞途径提供资料。 |
关键词: BMSC beta细胞 Insulin PDX-1 Nestin 糖尿病 |
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