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| 实时荧光定量PCR检测大肠癌患者外周血鸟苷酰环化酶C基因及其临床意义 |
| 毛振彪,王唯一,张冬雷,黄介飞,鞠少卿,MAOZhen-biao,WANGWei-yi,ZHANGDong-lei,HUANGJie-fei,JUShao-qing |
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| 摘要: |
| 目的:建立人鸟苷酰环化酶C(GC-C)含量实时荧光定量PCR(RFQ-PCR)检测的新方法,观察大肠癌患者外周血单个核细胞(PBMC)GC-C mRNA表达水平并探讨其临床意义.方法:在GC-C基因高保守区设计了特异性的引物和探针,RT-PCR扩增目的片段并实时检测产物的荧光强度,根据标准品建立的标准曲线,由软件自动计算出待测样本(30例健康献血员、11例大肠良性病变和37 例大肠癌)中GC-C mRNA准确含量,并以GC-C mRNA和β2微球蛋白 mRNA含量的比值作为评价GC-C表达水平的指标.结果:本法检测GC-C mRNA含量的线性范围为101 ～109 pg/ml,样本批内和批间变异系数(CV)值分别为6.87％～11.12％和8.86％～15.19％.30例健康献血员和11例大肠良性病变样本的PBMC中均未检出GC-C mRNA表达,大肠癌患者外周血GC-C mRNA的检出率为83.8％(31/37).大肠癌患者外周血PBMC GC-C mRNA表达水平为0.88±0.06,与Duke分期、淋巴结转移和肝转移密切相关,与年龄、性别、肿瘤大小等无关.结论:GC-C mRNA RFQ-PCR检测外周血大肠癌细胞具有较好的检测灵敏度、特异性和重复性,GC-C mRNA表达水平可能对指导大肠癌Duke分期、判断淋巴结转移和肝转移、指导术后综合治疗均有一定价值. |
| 关键词: 鸟苷酰环化酶C、结直肠肿瘤、外周血单个核细胞、实时荧光定量、逆转录聚合酶链反应 |
| DOI： |
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| 基金项目: |
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| Real-time fluorescence quantitative reverse transcription PCR in determination of guanylyl cyclase-C gene expression in peripheral blood of patients with colorectal cancer and its clinical significance |
| 毛振彪,王唯一,张冬雷,黄介飞,鞠少卿,MAO Zhen-biao,WANG Wei-yi,ZHANG Dong-lei,HUANG Jie-fei,JU Shao-qing |
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