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| 人p27~(kipl)可调控性重组腺病毒载体的构建及其在PC-3细胞中的表达 |
| 邱镇;孙颖浩;许传亮;王元天;沈茜;钱松溪;顾正勤;李云;ChinleeWu |
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| (第二军医大学长海医院泌尿外科,第二军医大学长海医院泌尿外科,第二军医大学长海医院泌尿外科,第二军医大学长海医院泌尿外科,长海医院中心实验室 ,第二军医大学长海医院泌尿外科,第二军医大学长海医院泌尿外科,第二军医大学长海医院泌尿外科,Department of Pathology,Massachusetts General Hospital,Bigelow 1102,55 Fruit Street,Boston,MA 2114-2696,USA 上海200433 ,上海200433 ,上海200433 ,上海200433 ...) |
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| 摘要: |
| 目的:体外构建人p27kipl可调控性重组腺病毒载体,并观察其在前列腺癌细胞系PC-3细胞中的表达及其对细胞生长的影响。方法:采用Ad-X Tet-Off表达系统,将人全长p27kipl cDNA经过穿梭载体,与可调控性腺病毒载体骨架连接,得到重组人p27kipl基因腺病毒(Ad-p27kipl),在HEK293细胞包装、扩增,获得高滴度病毒,采用空斑试验测定病毒滴度,体外转染PC-3细胞,RT-PCR、Western杂交分别检测目的基因不同水平的表达,并通过MTT法观察转染前后细胞增殖力的变化。Ad-X-TRE-β gal病毒作为对照。结果:构建的Ad-p27kipl病毒滴度为1.2×109 pfu/ml,RT-PCR、Western杂交检测有特异的高表达,转染后对细胞的生长有抑制作用。结论:体外连接法成功地构建携带人p27kipl基因的可调控性重组腺病毒载体,在人前列腺癌细胞系PC-3中有高表达并对细胞生长有抑制作用。 |
| 关键词: 前列腺癌 p27kipl 腺病毒载体 PC-3细胞株 |
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